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2013 Fiscal Year Research-status Report

口腔扁平上皮癌の浸潤開始スイッチ関連分子のプロテオーム解析

Research Project

Project/Area Number 25462849
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

程 クン  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (40207460)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山崎 学  新潟大学, 医歯学系, 助教 (10547516)
丸山 智  新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (30397161)
朔 敬  新潟大学, 医歯学系, 教授 (40145264)
阿部 達也  新潟大学, 医歯学総合病院, レジェンド (70634856)
Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords口腔癌 / 扁平上皮癌 / 浸潤制御 / 実質-間質 / 分子病理学
Research Abstract

(1) 免疫組織細胞化学的実験と三次元再構築:口腔粘膜扁平上皮癌の外科摘出材料フォルマリン固定パラフィン包埋標本について、それぞれパールカンほかのECMあるいは細胞骨格・細胞死関連分子の免疫組織化学の結果をもとに、連続切片200枚作製し、ECM分子とケラチン分子種とで腫瘍性間質と癌胞巣を識別し、バーチャルスライド法で写真撮影を行い、三次元的に再構築した。癌胞巣と腫瘍性間質の三次元的関連を明らかにし、浸潤癌の胞巣の連続性・分離性を検討するとともに腫瘍性間質の誘導レベルとの相関性について検討し、口腔癌の浸潤性の定義を客観的に行った。さらに、口腔癌角化胞巣について連続切片法で解析し、いわゆる癌真珠の崩壊にいたる自然史を明らかにした。
(2) 組織切片の選択的切り出し回収:免疫組織化学的に描出した連続切片を参考にして、浸潤癌の粘液様基質をともなう線維芽細胞主体の間質と実質とを、上皮内癌では癌胞巣周囲結合組織層と上皮層あるいは側方進展部界面を、扁平上皮癌では、癌胞巣最外層、傍基底層、中層部、胞巣周囲間質、遠位間質を区別して回収し、遺伝子ならびに蛋白質抽出実験に提供できるように準備した。
(3) 細胞培養実験:ヒト舌扁平上皮癌由来細胞 MK-1、ZK-1、ZK-2細胞と OF-1などヒト由来株化線維芽細胞あるいはヒト末梢血由来単球を、直接・間接接触の単層共培養実験をおこない、混合比率や検索すべき分子・遺伝子のスクリーニングを行った。単層培養では、界面部を主体に、実質・間質胞巣について区別回収を試み、その効率化を検討した。新たに検討した分子は connexin 43 などの gap junction 分子と claudin 1・zonula occludens 1 などの tight junction分子である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

基本的に当初の研究の目的と計画に沿って実験を進めてきている。とくに、口腔粘膜扁平上皮癌の外科摘出材料フォルマリン固定パラフィン包埋標本について、連続性切片を作製し、パールカンをはじめとする細胞外基質関連分子の免疫組織化学的結果をもとに、癌細胞と腫瘍性間質の三次元構築を完成して、その実質と間質の相関性を検討した結果を論文にまとめて発表し、口腔扁平上皮癌の浸潤の概念とその臨床的判定法に新たな局面を開き得たのは大きな成果であった。

Strategy for Future Research Activity

腫瘍細胞の三次元培養は、今後の研究の推進にもっとも重要なステップになるので、来年度以降は、適切な条件で培養細胞レベルの三次元構築を目標に実験を重ねて行く方針である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

免疫組織化学的な実験をおこなうための抗体を購入する予定でしたが、輸入品の抗体の価額が増額したため、翌年度分の請求した助成金とあわせて、使用することにしました。
上記とおり、抗体を購入する予定です。

  • Research Products

    (11 results)

All 2014 2013

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 3 results,  Acknowledgement Compliant: 3 results) Presentation (6 results)

  • [Journal Article] Perlecan-enriched intercellular space of junctional epithelium provides primary infrastructure for leucocyte migration through squamous epithelial cells2014

    • Author(s)
      Maruyama S, Itagaki M, Ida-Yonemochi H, Kubota T, Yamazaki M, Abe T, Yoshie H, Cheng J, Saku T
    • Journal Title

      Histochemistry and Cell Biology

      Volume: 142 Pages: 297-305

    • DOI

      10.1007/s00418-014-1198-x

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Three-dimensional visualization of perlecan-rich neoplastic stroma induced concurrently with the invasion of oral squamous cell carcinoma2014

    • Author(s)
      Maruyama S, Shimazu Y, Kudo T, Sato K, Yamazaki M, Abe T, Babkair H, Cheng J, Aoba T, Saku T
    • Journal Title

      Journal of Oral Pathology and Medicine

      Volume: 43 Pages: 627-636

    • DOI

      10.1111/jop.12184

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Keratin pearl degradation in oral squamous cell carcinoma: reciprocal roles of neutrophils and macrophages2014

    • Author(s)
      Essa AAM, Yamazaki M, Maruyama S, Abe T, Babkair H, Cheng J, Saku T
    • Journal Title

      Journal of Oral Pathology and Medicine

      Volume: 43 Pages: 778-784

    • DOI

      10.1111/jop.12197

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Intramuscular keratocyst as a soft tissue counterpart of keratocystic odontogenic tumor: differential diagnosis by immunohistochemistry2014

    • Author(s)
      Abe T, Maruyama S, Yamazaki M, Essa A, Babkair H, Mikami T, Shingaki S, Kobayashi T, Hayashi T, Cheng J, Saku T
    • Journal Title

      Human Pathology

      Volume: 45 Pages: 110-108

    • DOI

      10.1016/j.humpath.2013.08.011

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Podoplanin-mediated cell adhesion through extracellular matrix in oral squamous cell carcinoma2013

    • Author(s)
      Tsuneki M, Yamazaki M, Maruyama S, Cheng J, Saku T
    • Journal Title

      Laboratory Investigation

      Volume: 93 Pages: 921-931

    • DOI

      doi: 10.1038/labinvest.2013.86

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 口蓋腫瘍2013

    • Author(s)
      程 クン, 丸山 智, 阿部達也, 山崎 学, 朔  敬
    • Organizer
      第24回日本臨床口腔病理学会総会・学術大会
    • Place of Presentation
      日本大学理工学部1号館 CSTホール、東京都
    • Year and Date
      20130828-20130830
  • [Presentation] Connexin, a gap junction molecule, in oral carcinoma in-situ and squamous cell carcinoma2013

    • Author(s)
      Essa AA, Yamazaki M, Maruyama S, Abe T, Cheng J, Saku T
    • Organizer
      第24回日本臨床口腔病理学会総会・学術大会
    • Place of Presentation
      日本大学理工学部1号館 CSTホール、東京都
    • Year and Date
      20130828-20130830
  • [Presentation] Tight junction molecules in oral carcinoma in-situ and squamous cell carcinoma2013

    • Author(s)
      Babkair H, Cheng J, Maruyama S, Yamazaki M, Abe T, Essa AA, Saku T
    • Organizer
      第24回日本臨床口腔病理学会総会・学術大会
    • Place of Presentation
      日本大学理工学部1号館 CSTホール、東京都
    • Year and Date
      20130828-20130830
  • [Presentation] 口腔扁平上皮癌の側方進展界面における細胞死2013

    • Author(s)
      阿部達也,丸山 智,Essa Ahmed, Babkair Hamzah, 山崎 学, 程 クン, 朔  敬
    • Organizer
      第102回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      ロイトン札幌、札幌市
    • Year and Date
      20130606-20130608
  • [Presentation] MFG-E8は口腔扁平上皮癌の進展と死細胞貪食を促進する2013

    • Author(s)
      山崎 学, 程 クン, 丸山 智,阿部達也,朔  敬
    • Organizer
      第102回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      ロイトン札幌、札幌市
    • Year and Date
      20130606-20130608
  • [Presentation] Stromal macrophages in oral squamous cell carcinoma2013

    • Author(s)
      Essa Ahmed, 山崎 学, 丸山 智,阿部達也,Babkair Hamzah, 程 クン, 朔  敬
    • Organizer
      第102回日本病理学会総会
    • Place of Presentation
      ロイトン札幌、札幌市
    • Year and Date
      20130606-20130608

URL: 

Published: 2015-05-28  

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