2013 Fiscal Year Research-status Report
ナノ技術を応用したレジン上への歯周組織再生を伴う接着治療法の開発
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25462943
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
田中 佐織 北海道大学, 大学病院, 助教 (90344522)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 加菜 北海道大学, 大学病院, 医員 (40600127)
宮治 裕史 北海道大学, 大学病院, 講師 (50372256)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ナノテクノロジー / 歯周組織再生 / カーボンナノチューブ / ナノβ‐TCP / 細胞培養シート / レジン |
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| Research Abstract |
基礎的研究により、rhBMP-2と骨髄細胞培養シートを応用したβ-TCP添加レジン上にはわずかに硬組織形成が観察され、レジン上に歯周組織再生の可能性があることを見出した。この可能性は、bioactivityが大きいとされるナノ材料であるカーボンナノチューブ(CNT)とナノβ-TCPを応用すればさらに高めることができると考えた。本研究は、レジン表面にCNTとナノβ-TCPをコーティングし、コーティング面に培養細胞シートを貼り、レジン上に歯周組織再生を実現することを目的として行われた。
1）ナノカーボン分散液にナノβ-TCPを混合しコーティング処理し、コーティングの状態、細胞適合性等の生物学的特性を評価し、細胞接着性に最適なナノカーボン分散液の濃度・浸漬時間を検討した結果、CNT濃度は0.5%、ナノβ-TCPは0.1%浸漬時間60秒に決定した。２）細胞付着性試験：細胞にはMC3T3-E1細胞を用いた。plateにcontrol、CNTのみとナノβ-TCPのみ、CNT＋ナノβ-TCPでコーティングしたレジンブロックに細胞を播種、37℃、5％CO2条件下で培養を行い、培養1日後、3日後後に各試料を固定し、SEMにてコーティングしたレジン上の細胞の付着状態、形態、伸展の様子を観察し、コーティングしていないレジン上の細胞と比較検討した。7、14日後に、ALP活性の測定をpNPP法で行った。CNT＋ナノβ-TCP群で、細胞付着が促進されていた。３）生体適合性試験：ラットに全身麻酔および局所麻酔を施し、背部皮下にcontrol、CNTのみとナノβ-TCPのみ、CNT＋ナノβ-TCPでコーティングしたレジンを移植し、組織標本を作製し生体適合性を評価した。10日後と5週後にHE染色して組織標本を作製した。現在観察・比較検討中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ当初の計画通り、進行している。背部皮下に埋植した試料作製、観察が若干遅れているが、５月初旬には評価できると思われる。
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| Strategy for Future Research Activity |
組織標本の試料数を増やし、より確実な結果を得る。培養細胞シート作製を確実に行い、26年度に予定している実験に用いることが重要である。
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