2013 Fiscal Year Research-status Report
HBp17／FGFBP蛋白を標的とした口腔癌の分子標的診断・治療法の開発研究
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25463109
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
新谷 智章 広島大学, 大学病院, 助教 (90403518)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡本 哲治 広島大学, 医歯薬保健学研究(院), 教授 (00169153)
林堂 安貴 広島大学, 大学病院, 講師 (70243251)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | HBp17/FGFBP |
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| Research Abstract |
これまで1α,25(OH)2D3が口腔扁平上皮癌細胞（OSCC）におけるHBp17/FGFBP-1に与える影響について検討を行ってきた。その結果、1α,25(OH)2D3がNF-kBを介しHBp17/FGFBP-1発現を抑制し、それに伴い培地中に分泌されるFGF-2 タンパク量も抑制するということを明らかにしてきた。
ED-71は1α,25(OH)2D3に比べ低濃度でHBp17の発現を抑制する。ED-71の効果をin vitro実験で確認すること、また癌幹細胞に対する効果も検討することを目的とした。
研究実施内容として、実験はすべて無血清培養系で行なった。(1)NA 細胞においてED-71によるHBp17の影響を調べる。(2)Sphere形成に及ぼすED-71の効果を検討する実験を行う。(3)NA 細胞を移植して腫瘍形成させた免疫不全マウスにED-71投与して腫瘍形成抑制効果を検討する。
NA細胞にED-71(0.4nM~40nM)を添加して培養後、定量PCRによってHBp17/FGFBP-1 mRNA発現量を測定した。NA細胞においてもHBp17/FGFBP-１の発現は30%近くまで抑制された。NA親細胞のSphere形成に対するED-71の影響を調べた。その結果、蛍光免疫染色では、ED-71の濃度が高くなるに従いNA親細胞のSphere形成が低下するようにみえた。NA親細胞において、VD3では濃度依存的にSphere形成阻害があったが、ED-71では顕著な阻害がみられなかった。今後はCD133(+)NA細胞についてShere形成へのED-71の影響をGFP発光を指標としてさらに詳細に検討する必要があると考える。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまで、ED71の腫瘍細胞に対する効果の検討をin vitroで行ってきた。ED71によりHBp17/FGFBPの発現抑制が明らかとなった。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、in viroにおける実験および、癌幹細胞へ応用する予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
ヌードマウスを購入し、腫瘍細胞を移植する予定であったが、細胞の準備に時間がかかったため。
ヌードマウスを購入し、in vivoにおける、ED71の効果の検討を行う。
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