2014 Fiscal Year Research-status Report
炎症性骨吸収に対する間葉系幹細胞由来破骨細胞分化抑制ペプチドの作用機序の解明
| Project/Area Number |
25463224
|
|---|
| Research Institution | Iwate Medical University |
|---|
Principal Investigator |
高橋 典子 岩手医科大学, 歯学部, 研究員 (60405777)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
帖佐 直幸 岩手医科大学, 歯学部, 講師 (80326694)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | 間葉系幹細胞 / SCRG1 / 破骨細胞 / 炎症性骨吸収 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
単球・マクロファージ由来の破骨細胞の形成には骨芽細胞との細胞間接触による分化促進作用が重要な役割を果たす。骨芽細胞は間葉系幹細胞（MSC）から分化することは既知であるが、MSCが破骨細胞分化に与える影響については明らかになっていない。本年度はMSCが分泌するペプチドSCRG1が破骨細胞分化に与える影響を検討した。最初に発現ベクターpSCRG1-FLAGを構築し、HEK293に導入して過剰発現させ、抗FLAG抗体アフィニティーカラム精製によって組換えSCRG1（rSCRG1）を作製した。得られたrSCRG1と可溶性receptor activator of nuclear factor κ-B ligand（sRANKL）でマウスマクロファージ様細胞Raw264.7を処理し、破骨細胞分化におけるSCRG1の影響を検討した。破骨細胞分化は酒石酸抵抗性酸ホスファターゼ（TRAP）陽性かつ細胞融合による多核化が認められる細胞をカウントすることにより評価した。その結果、Raw264.7をsRANKL単独で処理すると効率良くTRAP陽性かつ多核の破骨細胞が形成された。しかしながら、sRANKLとともに rSCRG1でも処理すると破骨細胞の形成は有意に抑制された。このことからSCRG1は破骨細胞分化を抑制することが示された。破骨細胞分化促進作用をもつ骨芽細胞においてSCRG1の発現は大きく減少していることから、SCRG1を発現しているMSCは破骨細胞分化抑制作用をもつ可能性が示唆された。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究計画に従い、本年度はSCRG1による破骨細胞分化の抑制を証明した。平成25年度の研究成果と併せ、炎症性骨吸収の場における間葉系幹細胞の役割をSCRG1に着目して解明しつつある。これらの成果は本研究課題最大の目的である。したがって本年度の達成度は順調であり、研究全体もおおむね順調に進展していると判断した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
次年度以降はSCRG1の炎症性骨吸収抑制効果の発現メカニズムについて明らかにする。研究期間内にSCRG1の破骨細胞分化抑制効果ならびに破骨細胞前駆細胞の未分化能維持をin vitro・in vivo両者で明らかにする。in vitroにおいて1）破骨細胞分化を促進する細胞内シグナル伝達系（NFκB、c-fos/NFATなど）の活性化に対するSCRG1の抑制効果を検証しつつ、2）炎症性サイトカインの分泌や遊走能を評価することによって、SCRG1の破骨細胞前駆細胞の未分化能維持を検証する。さらに主として疾患モデル動物を用いたin vivoの実験系において3）SCRG1過剰発現MSCを歯周炎や慢性関節リウマチモデル動物に投与し、炎症性骨吸収の抑制効果や骨リモデリングに及ぼす影響を評価する。これらin vitro・in vivo両者における実験結果から、MSCで特異的に発現しているSCRG1による破骨細胞分化抑制効果と、炎症性骨吸収に対する抑制効果の作用機序を解明する。
|
-
[Journal Article] Recruitment of mesenchymal stem cells by stromal cell-derived factor 1α in pulp cells from deciduous teeth2015
Author(s)
Akazawa Y., Hasegawa T., Yoshimura Y., Chosa N., Asakawa T., Ueda K., Sugimoto A., Kitamura T., Nakagawa H., Ishisaki A., Iwamoto T.
-
Journal Title
International Journal of Molecular Medicine
Volume: 36
Pages: 442-448
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Establishment of immortalized mesenchymal stem cells derived from the submandibular glands of tdTomato transgenic mice2015
Author(s)
Furukawa S., Kuwajima Y., Chosa N., Satoh K., Ohtsuka M., Miura H., Kimura M., Inoko H., Ishisaki A., Fujimura A., Miura H.
-
Journal Title
Experimental and Therapeutic Medicine
Volume: 10
Pages: 1380-1386
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
-
[Journal Article] The homeobox gene DLX4 promotes generation of human induced pluripotent stem cells2014
Author(s)
Tamaoki N., Takahashi K., Aoki H., Iida K., Kawaguchi T., Hatakeyama D., Inden M., Chosa N., Ishisaki A., Kunisada T., Shibata T., Goshima N., Yamanaka S., Tezuka K.
-
Journal Title
Scientific Reports
Volume: 4
Pages: 7283
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
-
-
-
-
