2015 Fiscal Year Annual Research Report
歯根膜の初期破壊に関わる非コラーゲン性構造タンパク質について
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25463231
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Research Institution | Tsurumi University |
Principal Investigator |
深江 允 鶴見大学, 歯学部, 名誉教授 (40064373)
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Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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Keywords | 歯根膜 / 非コラーゲン性タンパク質 / デコリン / 破骨細胞 / トランスフォーミング成長因子ベータ |
Outline of Annual Research Achievements |
歯周組織の破壊メカニズムについて、臨床で保存不可と診断された抜去歯を試料として、タンパク質、プロテアーゼの変化を調べたところ、炎症性刺激によって最初に分解されるのはコラーゲン線維ではなく、刺激によって増加する好中球エラスターゼが非コラーゲン性タンパク質(NCP)を分解することから始まることを示した。さらに、それらのNCPの中で、Stains-all色素陽性の110 kDaタンパク質の分解から始まることがわかったので、このタンパク質の同定とその性質を調べることを目的とした。 ブタの正常歯根膜から多量に含まれる血液成分を除去した後、歯根膜固有のNCPを種々の溶液を使って段階的に抽出した結果、目的の110kDaのタンパク質はコラーゲン線維にイオン結合していると考えられた。またこのタンパク質が免疫科学的にデコリンと同定出来たので、さらにヘパリンカラムで分画精製し、ヒト歯根膜由来培養細胞(PDL細胞)を使用して生理活性を調べると、ALP活性を上昇させることがわかった。この生理活性物質はELISA法でTGF-b1であることが判明し、それがデコリンに結合していると考えられる結果が得られた。別な実験系として、TGF-b1はRANKLで刺激したマウスマクロファージ由来のがん細胞株であるRAW264.7細胞を破骨細胞に分化誘導することが判明したので、ブタ乳歯の歯根吸収中の組織から吸収部位を分離調整し、TGF-bの活性と破歯細胞の存在との関連を調べた。その結果、両者の相関性が高いことが判明した。これらの結果から、歯根膜組織のコラーゲン線維に結合したデコリンとTGF-bの複合体が永久歯歯胚の刺激で歯根吸収が起こるとき、プロテアーゼ(このプロテアーゼはまだ特定されていないが)によってコラーゲン線維から遊離し、その局所に破歯脂肪を誘導するのではないかと考えられた。
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