2013 Fiscal Year Research-status Report
ヒト多能性幹細胞Muse細胞からの精子細胞系樹立の試み
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25670087
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
年森 清隆 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20094097)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 千鶴 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80347054)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | Muse細胞 / 精子幹細胞 / ストレス処理 |
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| Research Abstract |
1.Muse幹細胞から精子幹細胞系へ誘導するために必要な遺伝子/分子と因子を絞り込み、Muse幹細胞を含むMuse-GFP細胞の長期培養系の準備を進めた。
2.W/Wvミュータントマウスの精巣（セルトリ細胞only）精細管内への移植は問題ないが、導入細胞の前処理が必要であるため、その条件を検討した。レポーター遺伝子Acrosin-GFPマウスの脾臓細胞を採取し、さまざまのストレスのなかから酸処理をして精細管内への注入実験を行った結果、まだ良い結果は得られていないが、長期生存しているマウスについてもう少し時期を延ばしてから開腹し蛍光観察する。これらの条件検討を踏まえて、次年度にMuse-GFP細胞のインジェクションを増やす。酸処理意外に様々なストレス処理が有効である可能性があるため、ヒト化細胞やマウス細胞＋ストレス処理＋誘導処理（例えば、FGFやLIF）を行い、うまく発現する系を選別する。
3.遺伝子導入が必要な場合のためにMuse-GFP細胞に導入するためのトランスフェクション準備を整えた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Muse幹細胞から精子幹細胞への誘導についてはこれまで報告がないため、手探りの状態である。Muse幹細胞の最適の前処理と最適の関連分子や遺伝子の組合わせを見つけ出すことが困難である。分化した細胞からさまざまの処理により初期化に向かい、精子幹細胞系へ向かう最適条件を探すことが難しい。
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| Strategy for Future Research Activity |
様々な前処理をすることには問題無いため、頻回に実験を行うためのMuse-GFP細胞長期培養系を確立する。大きな問題は、Muse幹細胞の含有率であるが、1回のinjectionで10000個程度を注入できれば、たとえその中に1％以下の濃度であったとしても、これまでの実験から精細管内では定着できる可能性がある。最適のヒト化細胞やマウス細胞＋ストレス処理＋誘導処理（例えば、FGFやLIF）を行う条件を見いだすための実験を行う。移植実験手技や解析方法には全く問題はない。
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[Journal Article] A heterozygous mutation of GALNTL5 affects male infertility with impairment of sperm motility.2014
Author(s)
Takasaki N, Tachibana K, Ogasawara S, Matsuzaki H, Hagiuda J, Ishikawa H, Mochida K, Inoue K, Ogonuki N, Ogura A, Noce T, Ito C, Toshimori K, Narimatsu H
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci USA.
Volume: 111
Pages: 1120-1125
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Oligo-astheno-teratozoospermia in mice lacking ORP4, a sterol-binding protein in the OSBP-related family.2014
Author(s)
Udagawa O, Ito C, Ogonuki N, Sato H, Lee S, Tripvanuntakul P, Ichi I, Uchida Y, Nishimura T, Murakami M, Ogura A, Inoue T, Toshimori K, Araki H.
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Journal Title
Genes Cells.
Volume: 19(1)
Pages: 13-27
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] The Arf GAP SMAP2 is Necessary for Organized Vesicle Budding from the Trans-Golgi-network and Subsequent Acrosome Formation in Spermiogenesis.2013
Author(s)
Funaki T, Kon S, Tanabe K, Natsume W, Sato S, Shimizu T, Yoshida N, Wong WF, Ogura A, Ogawa T, Inoue K, Ogonuki N, Miki H, Mochida K, Endoh K, Yomogida K, Fukumoto M, Horai R, Iwakura Y, Ito C, Toshimori K, Watanabe T, Satake M.
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Journal Title
Mol Biol Cell.
Volume: 24(17)
Pages: 2633-2644
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Tysnd1 deficiency in mice interferes with the peroxisomal location of PTS2 enzymes, causing lipid metabolic abnormalities and male infertility.2013
Author(s)
Mizuno Y, Ninomiya y, Nakachi Y, Iseki M, Iwasa H, Akita M, Tsukui T, Shimozawa N, Ito C, Toshimori K, Nishimura M, Hara H, Maeba R, Okazaki T, Alodaib AN, Amoudi MA, Jacob M, Alkuraya FS, Horai Y, Watanabe M, Motegi H, Wakana S, Noda T, Kurochkin IV, Mizuno Y, Schonbach C, Okazaki Y.
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Journal Title
PLoS genet
Volume: 9(2)
Pages: e1003286
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Galnt3 deficiency disrupts acrosome formation and leads to oligoasthenoteratozoospermia.2013
Author(s)
Miyazaki T, Mori M, Yoshida CA, Ito C, Yamatoya K, Moriishi T, Kawai Y, Komori H, Kawane T, Izumi S, Toshimori K, Komori T.
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Journal Title
Histochem and Cell Biol
Volume: 139(2)
Pages: 339-354
DOI
Peer Reviewed
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