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2013 Fiscal Year Research-status Report

カイコ個体内遺伝子導入による実験モデル生物の開発

Research Project

Project/Area Number 25670134
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

畠山 鎮次  北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70294973)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Keywords遺伝学 / 遺伝子 / 昆虫 / タンパク質 / ウイルス
Research Abstract

機能未知のヒト遺伝子や遺伝子異常が原因とされる疾患を解析する場合、マウスやラットなど哺乳動物の遺伝子改変動物を作製することが従来から行われてきた。近年になり、下等生物からヒトまでのさまざまな生物のゲノム構造(遺伝子配列)が報告され、多くの遺伝子にヒトホモログhomolog(オーソログortholog)が存在することが判明した。したがって、それぞれの遺伝子の解析の際、条件が合った実験生物モデルを選択することが重要となる。カイコ(幼虫:約8 cm、6 g)は個体サイズが成体マウス(5 cm、約25 g)に近いので生化学的および形態学的解析が可能であり、かつショウジョウバエ研究のように遺伝子操作が容易であるので、ヒト疾患モデル生物として利用価値が高い。本申請では、これらの利点に基づき、ヒト遺伝性疾患解析のモデル生物としてカイコを利用するために、汎用性カイコ内遺伝子発現システムを樹立することを進めた。EGFPやDs-RedcDNAをAcNPV系バキュロウイルス発現ベクター系にサブクローニングし、レポーターコンストラクトを作製した。その後、Bac-to-bacバキュロウイルス発現システムを使用して改変バキュロウイルスを作製した。次に九州大学遺伝子資源開発研究センターから分与可能なカイコ系統のうち、AcNPVが感染し発現可能性の高い各種のカイコ系統(d17,系統など)を譲り受け、感染効率を検討した。さらに、目的遺伝子の安定発現カイコの作製に向けて、piggyBac系によるトランスポゾンシステムの発現ベクター及びその改変バキュロウイルスウイルスを作製した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

今年度において、初年度計画していた実験の遂行が概ねできており、来年度は計画通りにさらに研究を発展させる段階にあるから。

Strategy for Future Research Activity

概ね計画通りに遂行されているので、現在のところ、変更や課題点はない。

  • Research Products

    (12 results)

All 2015 2014 2013

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (7 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] The TRIM-FLMN protein TRIM45 directly interacts with RACK1 and negatively regulates PKC-mediated signaling pathway2015

    • Author(s)
      Sato,T., Takahashi, H., Hatakeyama, S., Iguchi, A. and Ariga, T.
    • Journal Title

      Oncogene

      Volume: 34 Pages: 1280-1291, 2015

    • DOI

      10.1038/onc.2014.68

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] TRIM29 as a novel prostate basal cell marker for diagnosis of prostate cancer2014

    • Author(s)
      Kanno, Y., Watanabe, M., Kimura, T., Nonomura, K., Tanaka, S. and Hatakeyama, S.
    • Journal Title

      Acta Histochem.

      Volume: 116 Pages: 708-712

    • DOI

      10.1016/j.acthis.2013.12.009

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 14-3-3 proteins sequester a pool of soluble TRIM32 ubiquitin ligase to repress autoubiquitination and cytoplasmic body formation2013

    • Author(s)
      Ichimura T, Taoka M, Shoji I, Kato H, Sato T, Hatakeyama S, Isobe T, Hachiya N
    • Journal Title

      J. Cell Sci.

      Volume: 126 Pages: 2014-2016

    • DOI

      10.1242/jcs.122069

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Siglec-15 Regulates Osteoclast Cytoskeletal Organization in Association with Signaling Adaptor DAP122013

    • Author(s)
      Kameda Y, Takahata M, Komatsu M, Mikuni S, Hatakeyama S, Shimizu T, Angata T, Kinjo M, Minami A, Iwasaki N
    • Journal Title

      J. Bone Miner. Res.

      Volume: 28 Pages: 2463-2475

    • DOI

      10.1002/jbmr.1989

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification of anti-Sez6l2 antibody in a patient with cerebellar ataxia and retinopathy2013

    • Author(s)
      Yaguchi H, Yabe I, Takahashi H, Okumura F, Takeuchi A, Horiuchi K, Kano T, Kanda A, Saito W, Matsumoto M, Nakayama KI, Hatakeyama S, Sasaki H
    • Journal Title

      J. Neurol.

      Volume: 261 Pages: 224-226

    • DOI

      10.1007/s00415-013-7134-5

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] RNF43遺伝子変異によるがん抑制遺伝子からがん遺伝子への機能転換2013

    • Author(s)
      築山 忠維,福井 彰雅,寺井 小百合,藤岡 容一朗,品田 恵佐,Yamaguchi Terry,大場 雄介,畠山 鎮次
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド(神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] がん抑制遺伝子RNF43は異なるメカニズムによってWnt/beta-catenin経路とnoncanonical Wnt経路を抑制する2013

    • Author(s)
      築山忠維、畠山鎮次
    • Organizer
      第72回日本癌学会学術総会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(横浜)
    • Year and Date
      20131003-20131005
  • [Presentation] TRIMタンパク質の多彩な機能2013

    • Author(s)
      畠山鎮次
    • Organizer
      第86回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(横浜)
    • Year and Date
      20130911-20130913
    • Invited
  • [Presentation] ATDCはヒストンH2A.Xのリン酸化とヒストンH4のアセチル化を介してDNA日本鎖切断修復を制御する2013

    • Author(s)
      桝田安志、畠山鎮次
    • Organizer
      第86回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(横浜)
    • Year and Date
      20130911-20130913
  • [Presentation] Regulation of cellular functions by TRIM proteins2013

    • Author(s)
      Hatakeyama, S.
    • Organizer
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • Place of Presentation
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • Year and Date
      20130709-20130712
    • Invited
  • [Presentation] Involvement of linear polyubiquitylation in PPARγ transcriptional activity2013

    • Author(s)
      Watanabe, M., Takayashi, H., Hatakeyama, S.
    • Organizer
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • Place of Presentation
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • Year and Date
      20130709-20130712
  • [Presentation] Functional analysis of a novel multiprotein complex containing ataxia telangiectasia group D-complementing (ATDC) gene product, TRIM292013

    • Author(s)
      Masuda, Y., Takahashi, H., Matsumoto, M., Nakayama, K., Hatakeyama, S.
    • Organizer
      The 35th Naito Conference: The Ubiquitin-Protesome System: from Basic Mechanisms to Pathophysiological Roles
    • Place of Presentation
      シャトレーゼ ガトーキングダム札幌(札幌)
    • Year and Date
      20130709-20130712

URL: 

Published: 2015-05-28  

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