2014 Fiscal Year Annual Research Report
生体内不溶物質によるサイズ依存的なIL-1β産生経路の存在
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25670192
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
稲葉 カヨ 京都大学, 生命科学研究科, 教授 (00115792)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高原 和彦 京都大学, 生命科学研究科, 講師 (90301233)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 微細粒子 / 凝集体 / マイクログリア / IL-1β / アミロイド-b / 原子間力顕微鏡 / 炎症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
外因性及び内因性の微細粒子/蛋白凝集体は、マクロファージ等からの炎症性サイトカインIL-1βの産生を誘導し様々な炎症性疾患を引き起こす。平成25年度はラテックスビーズを用いてマウス脳マイクログリア（MG）における､ビーズサイズ依存的なIL-1β産生経路の存在を示した。26年度は、MGを用いて、アルツハイマー病の原因物質であり異なるサイズ/形状を持つ凝集体を形成するアミロイドβ (Aβ)のIL-1β産生誘導について検討した。
始めにAβ(1-42)ペプチドをRPMI培地又は100 mM HClに溶解し、それぞれoligomerおよびfibril凝集体を作製した。これら凝集体の形状/サイズを電気泳動及び原子間力顕微鏡で確認した。Fibril凝集体には若干のoligomerの混在を認め、これを遠心洗浄することで除いた。
次にこれらの凝集体をリポ多糖と共MGに加え、IL-1βの産生を検討したところ、oligomerにのみ産生誘導能が見られた。この際、oligomerおよびfibril凝集体ともにMGに取り込まれることを免疫染色にて確認した。次に、Aβを取り込んだ食胞の不安定化に起因するcathepsin Bの細胞質への漏出を検討した結果、oligomerのみに同現象が確認された。さらに、cathepsin B阻害剤CA-076-Meを加えたところMGからのIL-1β産生が低下した。さらに、cathepsin Bと並んでIL-1β産生に働くとされるreactive oxygen species (ROS)の阻害剤N-acetyl cysteine（NAC）を用いたところ、IL-1βの産生が低下した。
以上の結果から、アルツハイマー病の原因物質であるAβ凝集体の中で,oligomerがMGからのIL-1β産生をcathepsin BおよびROS依存的に誘導する事が明らかとなった。
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[Journal Article] Amyloid β oligomers induce interleukin-1β production in primary microglia in a cathepsin B- and reactive oxygen species-dependent manner2015
Author(s)
Taneo, J., Adachi, T., Yoshida, A., Takeyasu, K.,Takahara, K. and Inaba, K.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun.
Volume: 458
Pages: 561-756
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Functional Evaluation of Activation-dependent Alteration of Sialoglycans in T Cells2014
Author(s)
Naito-Matsui, Y., Takada, S., Kano, Y., Murata, K., Iyoda, T., Sugai, M., Shimizu, A., Inaba, K., Nitschke, L., Tsubata, T., Oka, S.
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Journal Title
J.Bio.Chem.
Volume: 289
Pages: 1564-1579
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Tracking and quantification of dendritic cell migration and antigen trafficking between the skin and lymph nodes.2014
Author(s)
Tomura, M., Hata, A., Matsuoka, S., Shand, FH., Nakanishi, Y., Ikebuchi, R., Ueha, S., Tsutsui, H., Inaba, K., Matsushima, K., Miyawaki, A., Kabashima, K., Watanabe, T. and Kanagawa, O.
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Journal Title
Sci. Rep.
Volume: 4
Pages: 1-11
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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