2014 Fiscal Year Research-status Report
再生医療技術を利用した新規HIV-1感染サルモデルの作成
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25670218
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
塩田 達雄 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00187329)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
明里 宏文 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (20294671)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | HIV-1 / iPS細胞 / 再生医療技術 / T細胞 / サル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
後天性免疫不全症候群（AIDS）の原因ウイルスであるヒト免疫不全ウイルス1型（HIV-1）は宿主域が狭く、ヒト以外に感染する動物はチンパンジーのみであり、アカゲザル、カニクイザル等の旧世界ザルやマーモセット等の新世界サルには感染しない。従って感染予防ワクチンの有効性を実験的に検定することが困難であり、ワクチン開発の大きな障害の一つとなっている。本研究は、サルの人工多能(iPS)細胞に遺伝子操作を加えて、HIV-1が個体内で感染・増殖できるサルを作出することを目的とする。今年度は現在エイズのサルモデルとして頻用されるもののiPS細胞樹立についてはごく少数の報告しかないアカゲザルのiPS細胞樹立を試みた。アカゲザル末梢血からT細胞を分離し、ヒトiPS細胞誘導因子であるOct3/4、Sox2、Klf4、c-Mycのいわゆる山中4因子を発現するセンダイウイルスを用いてアカゲザルのiPS細胞樹立を行った。山中4因子導入後に添加するサイトカインの種類やRock inhibitorの有無等、種々の条件を振ったところ、ヒトのT細胞の場合よりも厳密な条件が必要とされるもののiPS細胞を樹立することが出来た。樹立したアカゲザルiPS細胞の未分化能は、未分化マーカーSSEA-4やTRA-1-60の発現やアルカリホスファターゼ染色により確認できた。使用したセンダイウイルスベクターの除去を確認した後、血管内皮増殖因子、幹細胞因子およびFlt-3リガンドを用いてCD34陽性細胞への分化誘導を行い、フローサイトメーターで表面マーカーの確認が出来た。M-CSFで分化誘導した場合はマクロファージへの分化が確認され、免疫不全マウスに移植したところ、三胚葉の組織成分を含む奇形種が形成され、多分化能も確認された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度、アカゲザルiPS細胞樹立のための培養条件の最適化に当初の予想を遥かに越える時間を要したため、その遅れを今年度取り返すことができず、iPS細胞からのCD34陽性細胞やその先のマクロファージへの分化には成功したものの、当初計画していたiPS細胞からのT細胞への分化やそれらのサル個体への移植には至らなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
マーカー遺伝子を導入したiPS細胞由来細胞を免疫寛容状態である胎仔ザルに同種移植し、iPS細胞由来細胞がアカゲザル個体において定着しうるか否か、iPS細胞由来のT細胞の分化が観察されるか否かを検討する。
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| Causes of Carryover |
アカゲザル末梢血よりiPS細胞の樹立に成功したが、iPS細胞樹立のための条件設定に当初の予定以上の時間を要したため、サル個体への移植実験が来年度にずれ込む予定である。従って一部の研究費の繰り越しを希望する。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
サル個体より回収した生物材料の解析に用いる予定である。
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Research Products
(19 results)
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[Journal Article] Emergence of infectious malignant thrombocytopenia in Japanese macaques (Macaca fuscata) by SRV-4 after transmission to a novel host.2015
Author(s)
Okamoto M, Miyazawa T, Morikawa S, Ono F, Nakamura S, Sato E, Yoshida T, Yoshikawa R, Sakai K, Mizutani T, Nagata N, Takano J, Okabayashi S, Hamano M, Fujimoto K, Nakaya T, Iida T, Horii T, Miyabe-Nishiwaki T, Watanabe A, Kaneko A, Saito A, Matsui A, Hayakawa T, Suzuki J, Akari H, Matsuzawa T, Hirai H
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 5
Pages: 8850
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] New type of Sendai virus vector provides transgene-free iPS cells derived from chimpanzee blood.2014
Author(s)
Fujie Y, Fusaki N, Katayama T, Hamasaki M, Soejima Y, Soga M, Ban H, Hasegawa M, Yamashita S, Kimura S, Suzuki S, Matsuzawa T, Akari H, Era T
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 9
Pages: e113052
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Genome-wide association study of HIV-related lipoatrophy in Thai patients: Association of a DLGAP1 polymorphism with fat loss.2014
Author(s)
中山英美, Uttayamakul Sumonmal, Tiphaine Oudot-Mellakh, Pimrapat Tengtrakulcharoen, Julien Guergnon, Jean-Francois Delfraissy, Srisin Khusmith,Chariya Sangsajja, Sirirat Likanonsakul, Ioannis Theodorou,塩田達雄
Organizer
第28回日本エイズ学会学術集会・総会
Place of Presentation
大阪
Year and Date
2014-12-03 – 2014-12-05
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