2014 Fiscal Year Research-status Report
らい菌の鼻粘膜上皮細胞への侵入に係る分子機構を標的とした感染防御ワクチンの開発
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25670505
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
藤村 響男 北里大学, 医学部, 講師 (50209087)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | らい菌侵入抑制 / 抗mec抗体 / 高度免疫血清 / 感染防御ワクチン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ハンセン病は日本においては過去の疾患となりつつあるが、世界的には依然として毎年２５万人が発症しており、有効な感染防御ワクチンの開発が望まれている。我々はこれまで、らい菌が、鼻粘膜上皮細胞を標的として感染する事、及びその分子機構を明らかにしてきた。本研究の目的は、これらを踏まえ、本研究をハンセン病の感染予防およびワクチン開発ヘの基礎的検討の最終段階と位置づけ、実用化に向けてらい菌の鼻粘膜細胞への侵入ペプチドの各部位を標的とした各種抗体を用いて侵入抑制効果を検討するところにある。
これまでの研究結果から想定された侵入活性領域（316～531bp の領域)を316-387bp(106-129A.A.),388-453bp(130-151A.A.),454-486bp(152-162A.A.),および487-531bp(163-177A.A.)に4 分割して、夫々の領域に対する高度免疫血清を作製した。昨年度は、316～531bp の全侵入活性領域を外膜表示した組み換え大腸菌を用いて、130-151アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清の侵入抑制効果を検討し，同領域を免疫原とした抗体に侵入抑制効果がある事を明らかにした。本年度は、残り３領域に対する高度免疫血清の侵入抑制効果を同様に検討した。その結果、106-129アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清にも高い侵入抑制効果が認められたが、152-162アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清には、侵入抑制効果が認められなかった。163-177アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清には弱い侵入抑制効果を認めた。実際にらい菌を用いて侵入抑制効果を検討するため、現在らい菌を準備中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
初年度の高度免疫血清作製の遅延が影響し、遅れを取り戻せていない。加えて、本年度に検討した163-177アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清の侵入抑制効果が、実験毎にばらついた為、同領域の高度免疫血清を再度作製し検討し直したことで、さらに遅延した。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでに得られた結果をもとに、実際にらい菌を用いて侵入抑制効果を検討するため、現在らい菌を準備中である。侵入抑制効果は、電子顕微鏡に加え、蛍光ラベルしたらい菌を用いて共焦点レーザー顕微鏡を用いて検討する予定である。
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| Causes of Carryover |
本年度に予定していた、らい菌を用いた侵入抑制実験が来年度にずれ込んだ為。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
本来の翌年度分と併せ、次年度に全て使用する予定である。
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