アンドロゲン応答性ナチュラルアンチセンスRNAを標的とした前立腺癌の診断と治療

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25670678
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 高山 賢一 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50508075)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浦野 友彦 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (20334386) ; 井上 聡 東京大学, 医学部附属病院, 特任教授 (40251251)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 分子腫瘍学 / 内分泌学 / 病態医化学 / ゲノム医科学

Outline of Annual Research Achievements

平成26年度においては昨年度において同定された新規のアンドロゲン応答性のアンチセンスRNAの機能解析を行った。LNCaP細胞、VCaP細胞の両方においてdihydrotestosterone (DHT) 10 nM刺激にて24時間をピークに時間依存性に発現上昇を認めた。ChIP-seqのデータをもとにすべてのプロモーターもしくはエンハンサー領域にARのアンドロゲン依存的な結合を確認した。またsiRNAを設計しLNCaP細胞においてtransfectionを行った。48時間後にRNAを回収し定量RT-PCR解析によりアンチセンスRNAの発現低下を確認した。LNCaP細胞、VCaP細胞において発現の低下による浸潤能、増殖への影響を解析したところ、二つのアンチセンスRNAにおいて発現低下による浸潤能および増殖の低下を認めた。そこでアンチセンスRNAを2種類に絞り込み前立腺癌細胞における機能を解析し、一つはセンス側の遺伝子とHead to headの関係で双方向的なプロモーターを共有し、かつセンス側の蛋白コード遺伝子がOncogenicな機能を有する転写因子であり、ともにアンドロゲンに応答して発現が上昇していることからプロモーターの活性化に何らかの関与をしていることが示唆された。
研究計画書で予定していた前立腺癌の臨床サンプルにおける解析についてはCTBP1のアンチセンスRNAであるCTBP1-ASが病理組織標本において癌で発現が増殖していることを確認し報告している。さらに今回RNA-seqで同定されたアンチセンスRNAの発現について、今後腫瘍サンプルにおける発現を検討するため当施設の泌尿器科より提供された腫瘍サンプルでRNA-seqを行い前立腺癌、および治療抵抗性の前立腺癌における発現を解析する。現在、RNA抽出を行いシークエンスを施行中である。

Research Products

• [Journal Article] RUNX1, an androgen- and EZH2-regulated gene, has differential roles in AR-dependent and -independent prostate cancer (2015)
  • Author(s): Takayama K, Suzuki T, Tsutsumi S, Fujimura T, Urano T, Takahashi S, Homma Y, Aburatani H, Inoue S
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 6 Pages: 2263-2276
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Systemic identification of estrogen-regulated genes in breast cancer cells through cap analysis of gene expression mapping (2014)
  • Author(s): Yamaga R, Ikeda K, Boele J, Horie-Inoue K, Takayama K, Urano T, Kaida K, Carninci P, Kawai J, Hayashizaki Y, Ouchi Y, de Hoon M, Inoue S
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun Volume: 447 Pages: 531-536
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.04.033
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] CtBP2 modulates the androgen receptor to promote prostate cancer progression (2014)
  • Author(s): Takayama K, Suzuki T, Fujimura T, Urano T, Takahashi S, Homma Y, Inoue S
  • Journal Title: Cancer Res Volume: 74 Pages: 6542-6553
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-14-1030
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Expression of androgen and estrogen signaling components and stem cell markers to predict cancer progression and cancer-specific survival in patients with metastatic prostate cancer (2014)
  • Author(s): Fujimura T, Takahashi S, Urano T, Takayama K, Sugihara T, Obinata D, Yamada Y, Kumagai J, Kume H, Ouchi Y, Inoue S, Homma Y
  • Journal Title: Clin Cancer Res Volume: 20 Pages: 4625-4635
  • DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-13-1105
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PAPD5-mediated 3' adenylation and subsequent degradation of oncomiR miR-21 is disrupted in proliferative disease (2014)
  • Author(s): Boele J, Persson H, Shin JW, Ishizu Y, Newie I, Søkilde R, Hawkins SM, Coarfa C, Ikeda K, Takayama K, Horie-Inoue K, Ando Y, Burroughs AM, Sasaki C, Suzuki C, Sakai M, Aoki S, Ogawa A, Hasegawa A, Lizio M, Kaida K, Teusink B, Carninci P, Suzuki H, Inoue S, Gunaratne P, Rovira C, Hayashizaki Y, de Hoon M
  • Journal Title: Proc Natl Acad Sci U S A Volume: 111 Pages: 11467-11472
  • DOI: 10.1073/pnas.1317751111
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pyrrole-imidazole polyamide targeted to break fusion sites in TMPRSS2 and ERG gene fusion represses prostate tumor growth (2014)
  • Author(s): Obinata D, Ito A, Fujiwara K, Takayama K, Ashikari D, Murata Y, Yamaguchi K, Urano T, Fujimura T, Fukuda N, Soma M, Watanabe T, Nagase H, Inoue S, Takahashi S
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 105 Pages: 1272-1278
  • DOI: 10.1111/cas.12493
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Integrative analysis of FOXP1 function reveals a tumor suppressive effect in prostate cancer (2014)
  • Author(s): Takayama K, Suzuki T, Tsutsumi S, Fujimura T, Takahashi S, Homma Y, Urano T, Aburatani H, Inoue S
  • Journal Title: Mol Endocrinol Volume: 28 Pages: 2012-2024
  • DOI: 10.1210/me.2014-1171
  • Peer Reviewed
• [Presentation] [研究奨励賞口演部門最優秀賞] 新規アンドロゲン応答遺伝子G3BP2によるドセタキセル抵抗性及び去勢抵抗性前立腺癌への進展メカニズムの解析 (2015)
  • Author(s): 芦苅大作、高山賢一、大日方大亮、浦野友彦、井上聡、高橋悟
  • Organizer: 第24回泌尿器科分子細胞研究会
  • Place of Presentation: JPタワー ホール＆カンファレンス（東京都・千代田区）
  • Year and Date: 2015-02-27 – 2015-02-28
• [Presentation] アンドロゲン受容体による転写プログラムの統合的解析により同定された新たなエピジェネティック制御機構 (2014)
  • Author(s): 高山賢一、井上聡
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] [第33回日本癌学会奨励賞（基礎）受賞講演] ゲノム医学アプローチによる前立腺癌におけるアンドロゲン受容体転写ネットワークの解明 (2014)
  • Author(s): Takayama K, Inoue S
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] [International Sessions] アンドロゲンにより制御される長鎖非コードRNAを介した前立腺癌における腫瘍増殖促進機構の解明 (2014)
  • Author(s): 高山賢一、井上聡
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] アンドロゲン応答性の脂質代謝酵素ACSL3 は去勢抵抗性前立腺がんの増殖に関与する (2014)
  • Author(s): 右田敏郎、高山賢一、大日方大亮、池田和貴、浦野友彦、高橋悟、曽我朋義、井上聡
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] ChIP-sequence法の活用による前立腺癌細胞における新たなアンドロゲン受容体シグナルの同定 (2014)
  • Author(s): 芦苅大作、高山賢一、浦野友彦、大日方大亮、井上聡、高橋悟
  • Organizer: 第102回日本泌尿器科学会総会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県・神戸市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-27
• [Presentation] ピロール・イミダゾール・ポリアミド(PIP)を用いた前立腺癌関連融合遺伝子の発現抑制法の検討 (2014)
  • Author(s): 藤原恭子、大日方大亮、伊藤亜希子、高山賢一、浦野友彦、井上聡、相馬正義、高橋悟、永瀬浩喜、福田昇
  • Organizer: 第87回日本内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場（福岡県・福岡市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [Presentation] [Best Poster賞受賞] Expression of androgen and estrogen signaling components and stem cell markers is highly predictive of cancer progression of metastatic prostate cancer (2014)
  • Author(s): Fujimura T, Takahashi S, Urano T, Kume H, Takayama K, Murata T, Yamada Y, Obinata D, Inoue S, Homma Y
  • Organizer: 29th Annual Congress of the European Association of Urology
  • Place of Presentation: Stockholm, Sweden
  • Year and Date: 2014-04-11 – 2014-04-15
• [Presentation] Polyamide targeting transcription of long chain acyl-CoA synthetase 3: A novel therapeutic approach for prostate cancer (2014)
  • Author(s): Obinata D, Takayama K, Fujiwara K, Fukuda N, Urano T, Ito A, Ashikari D, Murata T, Fujimura T, Ikeda K, Horie-Inoue K, Inoue S, Takahashi S
  • Organizer: 29th Annual Congress of the European Association of Urology
  • Place of Presentation: Stockholm, Sweden
  • Year and Date: 2014-04-11 – 2014-04-15