2014 Fiscal Year Research-status Report
動的なオリゴマー形成因子によるWntシグナル伝達制御の構造的基盤
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25840017
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
寺脇 慎一 群馬大学, 大学院理工学府, 助教 (10452533)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Wntシグナル / DIXドメイン / X線結晶構造解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Wntシグナル伝達は、細胞の増殖、分化を制御する重要なシグナル伝達経路の一つであり、分泌型糖タンパク質Wntが、細胞膜上の受容体に結合することで伝達される。本研究では、Wnt結合型受容体の細胞直下に集積するAxin、Dvl、CCD1の可逆的なオリゴマー形成領域であるDIXドメインとそれらの複合体のX線結晶構造解析、相互作用解析、培養細胞を用いた転写活性測定をおこない、シグナル伝達経路を制御する分子機構の解明を目的とする。本年度は、ゼブラフィッシュ由来のCCD1 DIXドメインの結晶化、X線回折データ収集および分子置換法による位相決定をおこない、分解能1.96オングストロームでの立体構造決定に成功した。現在、これまでに構造解析したDIXドメインのオリゴマー構造との比較をおこない、機能解析に向けた変異体実験を実施している。また、CCD1-Axin複合体については、結晶化条件の最適化を進めて、分解能4.1オングストロームまでの回折データ収集に成功した。今後、重原子法を利用した位相決定を進めて、立体構造解析を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
CCD1-Axin複合体の構造解析において、分解能向上のための試行錯誤に時間を有したことが大きな理由である。一方で、DIXドメイン単独の構造解析では、機能解明につながる想定外の結果が得られており、研究目標の達成に向けた具体的な成果は得られてきている。
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| Strategy for Future Research Activity |
DIXドメイン単独の構造解析結果の論文発表をおこなう。CCD1-Axin複合体については、構造解析をすすめて、得られた立体構造情報から、分子間相互作用とシグナル伝達制御の仕組みを考察して、変異体等をもちいて機能モデルの検証をおこない、論文発表に向けた準備を進める。
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| Causes of Carryover |
CCD1-Axin複合体の構造解析に時間がかかっており、変異体作成および相互作用解析を次年度に持ち越したため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
変異体作成および相互作用解析をすすめて、機能モデルの検証をおこなう。
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