2014 Fiscal Year Annual Research Report
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25860280
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| Research Institution | Tokyo Medical University |
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Principal Investigator |
大野 慎一郎 東京医科大学, 医学部, 助教 (90513680)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | エクソソーム / 慢性Ｃ型肝炎 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
慢性C型肝炎では線維化の進行により肝硬変から高頻度で肝がんを発症する。線維化の進行は肝がんの発症率と相関することから発がんの防止には、C型肝炎ウイルス(HCV)の完全な排除と、線維化の有効な制御方法の開発が必須である。本研究では核酸による慢性C型肝炎の治療を実現するため、HCVの排除と慢性肝炎に伴う線維化の治療を目的とした新規の核酸医薬とDDSの開発を目指した。初めに、HCVのエンベロープを基礎にした改変型エクソソーム産生細胞を樹立するために、HCVのエンベロープ発現ベクターの作製を行った。HCVの全長DNAより、HCVのエンベロープを構成する５‘側のCore, E1, E2, P7, NS2領域をサブクローニングし、エンベロープベクターを作製した。エンベロープベクターは、肝癌細胞株Huh-7およびヒト胎児腎細胞HEK293に導入し、HCVエンベロープを恒常的に発現する細胞株の樹立を試みた。結果、Huh-7細胞と比較して、HEK293細胞で強いエンベロープタンパク質の発現を確認した。また、HCVの全長DNAより、HCVの複製を担う分子およびパッケージングシグナルを有する３’側のNS3, NS4A, NS4B, NS5A, NS5B領域をサブクローニングし、パッケージングベクターを作製した。以上の実験から、改変型エクソソーム発現HEK293細胞の樹立および、核酸医薬を改変型エクソソームに内包するためのパッケージングベクターの作製に成功した。本研究で樹立した改変型エクソソームは、肝細胞へ効率よく医薬を送達するためのＤＤＳとして慢性C型肝炎の治療をはじめ幅広く応用出来る可能性があり、また改変型エクソソームに効率よく核酸医薬を封入するパッケージングシステムは、核酸医薬の実現化を推進することが期待される。
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