大腸がんリンパ節転移決定因子であるbuddingの分子機構解明

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25860289
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 国田 朱子 東京大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50608768)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 浸潤 / 大腸がん

Outline of Annual Research Achievements

(1)budding形成大腸がん組織におけるpodoplaninの発現検討
大腸がんリンパ節転移に関与するbuddingの浸潤機構解明を目的として大腸がん検体におけるpodoplanin発現を高感度の抗podolanin抗体(LpMab-7)を用いた免疫染色により検討した。その結果budding部位のみならず間質のactive fibroblastでの発現が認められbudding形成にactive fibroblastが関与する可能性が示唆された。

(2)in vitroおよびin vivo buddingモデルの構築
大腸がん細胞株でpodoplanin発現が認められるものはごく少数であったが昨年度本研究実績の概要(1)で見出した高感度の染色性を示す抗podoplanin抗体（LpMab-7）を用いフローサイトメーターを行い、新たに2種のpodoplanin発現株を同定した。さらに、新たに浸潤アッセイ実験系としてコラーゲンゲル中のfibroblastへのがん細胞株の３次元浸潤能を評価する為のオルガノイドモデルの構築に成功した。実際の大腸がん組織でみられるbuddingと類似した浸潤像を示し、新たなin vitro buddingモデルといえる。さらにCRISPR-Cas9を用いpodoplanin発現をノックアウトした細胞株を樹立した。現在podoplanin発現株とノックアウト株での3次元浸潤能の検討を行っている。また、buddingを形成する為の間質の特徴の一つとしてmiRNA21(miR21)の発現に注目した研究を進めている。fibroblast細胞株にmiR21を強制発現させ浸潤能を検討したところがん細胞株の浸潤能が亢進した。budding形成がん細胞の浸潤に浸潤先の間質の環境が重要である事を見出した。

Research Products

• [Journal Article] Host SHP1 phosphatase antagonizes Helicobacter pylori CagA and can be downregulated by EBV. (2016)
  • Author(s): Saju P, Kamiya MN, Hayashi T, Senda Y, Nagase L, Noda S, Matsusaka K, Funata S, Kunita A, Urabe M, Seto Y, Fukayama M, Kaneda A, Hatakeyama M.
  • Journal Title: Nat Microbiol Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Oncogenic DUX4 fusions in B-cell acute lymphoblastic leukemia of adolescents and young adults. (2016)
  • Author(s): Yasuda T, Tsuzuki S, Kawazu M, Hayakawa F, Kojima S, Ueno T, Imoto N, Kohsaka S, Kunita A, Doi K, Sakura T, Yujiri T, Kondo E, Fujimaki K, Ueda Y, Aoyama Y, Ohtake S, Takita J, Sai E, Taniwaki M, Kurokawa M, Morishita S, Fukayama M, Kiyoi H, Miyazaki Y, Naoe T, Mano H.
  • Journal Title: Nat Genet Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • DOI: 10.1038/ng.3535.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Gut wall replacing type of gastrointestinal stromal tumor presenting as a perforation of the ileal diverticulum. (2015)
  • Author(s): Ikemura M, Kunita A, Miwa Y, Jimbo K, Mori K, Seto Y, Fukayama M.
  • Journal Title: Pathol. Res. Prac Volume: 211 Pages: 392-5
  • DOI: 10.1016/j.prp.2015.05.001
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] The chimeric antibody chLpMab-7 targeting human podoplanin suppresses pulmonary metastasis via ADCC and CDC rather than via its neutralizing activity. (2015)
  • Author(s): Kato Y*, Kunita A*, Abe S*, Ogasawara S, Fujii Y, Oki H, Fukayama M, Nishioka Y, Kaneko MK. (*; equal contributor)
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 6 Pages: 36003-18
  • DOI: 10.18632/oncotarget.5339.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Update on Epstein-Barr virus and gastric cancer (review). (2015)
  • Author(s): Shinozaki-Ushiku A, Kunita A, Fukayama M.
  • Journal Title: Int J Oncol. Volume: 46 Pages: 1421-34
  • DOI: 10.3892/ijo.2015.2856.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Profiling of Virus-encoded MicroRNAs in Epstein-Barr Virus-associated Gastric Carcinoma and their Roles in Gastric Carcinogenesis. (2015)
  • Author(s): Shinozaki-Ushiku A, Kunita A, Isogai M, Hibiya T, Ushiku T, Takada K, Fukayama M.
  • Journal Title: J Virol. Volume: 89 Pages: 5581-91
  • DOI: 10.1128/JVI.03639-14
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Hunner-Type (Classic) Interstitial Cystitis: A Distinct Inflammatory Disorder Characterized by Pancystitis, with Frequent Expansion of Clonal B-Cells and Epithelial Denudation. (2015)
  • Author(s): Maeda D, Akiyama Y, Morikawa T, Kunita A, Ota Y, Katoh H, Niimi A, Nomiya A, Ishikawa S, Goto A, Igawa Y, Fukayama M, Homma Y.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 10 Pages: 1-16
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0143316.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Presentation] 新規抗ポドプラニンキメラ抗体による抗腫瘍効果の検討 (2015)
  • Author(s): 国田朱子、 小笠原諭、金子美華、加藤幸成
  • Organizer: 第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [Presentation] マウス胃癌モデルを用いたLMP2Aの機能解析 (2015)
  • Author(s): 国田朱子、市村香代子、沼倉里枝、日比谷孝志、坂谷貴司、大島正伸 、深山正久
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 新規抗ポドプラニンキメラ抗体による転移抑制効果の検討 (2015)
  • Author(s): 国田 朱子、加藤 幸成、大木 弘治、西岡 安彦、深山 正久
  • Organizer: 第２４回日本がん転移学会学術集会総会
  • Place of Presentation: シティプラザ大阪（大阪府中央区）
  • Year and Date: 2015-07-23 – 2015-07-24