染色体レベルの高度なゲノム編集を可能にするCRISPR/Casシステムの開発

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25890014
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 佐久間 哲史 広島大学, 理学(系)研究科(研究院), 特任助教 (90711143)
• Project Period (FY): 2013-08-30 – 2015-03-31
• Keywords: ゲノム編集 / ゲノム生物工学 / 遺伝子ノックイン / CRISPR/Cas9

Outline of Annual Research Achievements

本年度は、前年度に確立したCRISPR/Cas9のオールインワンベクターシステムを用いて、効率的な遺伝子ノックインのシステム（PITCh法）を確立し、Nature Communications誌に論文を発表した。PITCh法は、マイクロホモロジー媒介性末端結合（MMEJ）と呼ばれる修復機構を利用した新規遺伝子ノックイン法であり、CRISPR/Cas9システムを用いてPITCh法を実行するためには、Cas9ヌクレアーゼと複数のガイドRNAを効率的に発現させることが必要不可欠である。本研究により、相同組換えの効率が低い細胞であっても高効率な遺伝子ノックインが実現可能となり、更にはこれまで遺伝子ノックインが極めて困難であった生物種（カイコやアフリカツメガエルなど）においてもノックインが適用できることが証明された。
また、本年度はこれまでのオールインワンベクターシステムを拡張し、ヌクレアーゼ活性を不活化させたCas9タンパク質（dCas9）や、dCas9に制限酵素FokIのヌクレアーゼドメインを付加したFokI-dCas9にも対応可能なアドオンを開発した。これらの拡張パックと従来のシステムを併用し、マウス受精卵での変異導入および複数遺伝子の同時破壊が可能であることを示した。これにより、本研究によって確立されたオールインワンCRISPR/Cas9ベクターシステムは、培養細胞のみならず、動物個体においても機能的であることが証明された。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Desmocollin-2 alone forms functional desmosomal plaques, with the plaque formation requiring the juxtamembrane region and plakophilins (2015)
  • Author(s): Fujiwara M, Nagatomo A, Tsuda M, Obata S, Sakuma T, Yamamoto T, Suzuki ST
  • Journal Title: J Biochem Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of mutant mice via the CRISPR/Cas9 system using FokI-dCas9 (2015)
  • Author(s): Hara S, Tamano M, Yamashita S, Kato T, Saito T, Sakuma T, Yamamoto T, Inui M, Takada S
  • Journal Title: Sci Rep Volume: - Pages: -
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Production of knockout mice by DNA microinjection of various CRISPR/Cas9 vectors into freeze-thawed fertilized oocytes (2015)
  • Author(s): Nakagawa Y, Sakuma T, Sakamoto T, Ohmuraya M, Nakagata N, Yamamoto T
  • Journal Title: BMC Biotechnol Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1186/s12896-015-0144-x
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Cloning-free CRISPR/Cas system facilitates functional cassette knockin in mice (2015)
  • Author(s): Aida T, Chiyo K, Usami T, Ishikubo H, Imahashi R, Wada Y, Tanaka K, Sakuma T, Yamamoto T, Tanaka K
  • Journal Title: Genome Biol Volume: 16 Pages: 87
  • DOI: 10.1186/s13059-015-0653-x
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Homeolog-specific targeted mutagenesis in Xenopus laevis using TALENs (2015)
  • Author(s): Nakade S, Sakuma T, Sakane Y, Hara Y, Kurabayashi A, Kashiwagi K, Kashiwagi A, Yamamoto T, Obara M
  • Journal Title: In Vitro Cell Dev Biol Anim Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1007/s11626-015-9912-0
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Hox10-regulated endodermal cell migration is essential for development of the ascidian intestine (2015)
  • Author(s): Kawai N, Ogura Y, Ikuta T, Saiga H, Hamada M, Sakuma T, Yamamoto T, Satoh N, Sasakura Y
  • Journal Title: Dev Biol Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2015.03.018
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A High Excision Potential of TALENs for Integrated DNA of HIV-Based Lentiviral Vector (2015)
  • Author(s): Ebina H, Kanemura Y, Misawa N, Sakuma T, Kobayashi T, Yamamoto T, Koyanagi Y
  • Journal Title: PLoS One Volume: 10 Pages: e0120047
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0120047
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Precise in-frame integration of exogenous DNA mediated by CRISPR/Cas9 system in zebrafish (2015)
  • Author(s): Hisano Y, Sakuma T, Nakade S, Ohga R, Ota S, Okamoto H, Yamamoto T, Kawahara A
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 5 Pages: 8841
  • DOI: 10.1038/srep08841
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Tailor-made TALEN system for highly efficient targeted gene replacement in the rice blast fungus (2015)
  • Author(s): Arazoe T, Ogawa T, Miyoshi K, Yamato T, Ohsato S, Sakuma T, Yamamoto T, Arie T, Kuwata S
  • Journal Title: Biotechnol Bioeng Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1002/bit.25559
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The Microtubule-Depolymerizing Activity of a Mitotic Kinesin Protein KIF2A Drives Primary Cilia Disassembly Coupled with Cell Proliferation (2015)
  • Author(s): Miyamoto T, Hosoba K, Ochiai H, Royba E, Izumi H, Sakuma T, Yamamoto T, Dynlacht BD, Matsuura S
  • Journal Title: Cell Rep Volume: - Pages: -
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2015.01.003
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Unliganded thyroid hormone receptor α regulates developmental timing via gene repression in Xenopus tropicalis (2015)
  • Author(s): Choi J, Suzuki KT, Sakuma T, Shewade L, Yamamoto T, Buchholz DR
  • Journal Title: Endocrinology Volume: 156 Pages: 735-744
  • DOI: 10.1210/en.2014-1554
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Precise correction of the dystrophin gene in duchenne muscular dystrophy patient induced pluripotent stem cells by TALEN and CRISPR-Cas9 (2015)
  • Author(s): Li HL, Fujimoto N, Sasakawa N, Shirai S, Ohkame T, Sakuma T, Tanaka M, Amano N, Watanabe A, Sakurai H, Yamamoto T, Yamanaka S, Hotta A
  • Journal Title: Stem Cell Reports Volume: 4 Pages: 143-154
  • DOI: 10.1016/j.stemcr.2014.10.013
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Microhomology-mediated end-joining-dependent integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas9 (2014)
  • Author(s): Nakade S, Tsubota T, Sakane Y, Kume S, Sakamoto N, Obara M, Daimon T, Sezutsu H, Yamamoto T, Sakuma T, Suzuki KT
  • Journal Title: Nat Commun Volume: 5 Pages: 5560
  • DOI: 10.1038/ncomms6560
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Stochastic promoter activation affects Nanog expression variability in mouse embryonic stem cells (2014)
  • Author(s): Ochiai H, Sugawara T, Sakuma T, Yamamoto T
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 4 Pages: 7125
  • DOI: 10.1038/srep07125
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Targeted gene disruption by use of transcription activator-like effector nuclease (TALEN) in the water flea Daphnia pulex (2014)
  • Author(s): Hiruta C, Ogino Y, Sakuma T, Toyota K, Miyagawa S, Yamamoto T, Iguchi T
  • Journal Title: BMC Biotechnol Volume: 14 Pages: 95
  • DOI: 10.1186/s12896-014-0095-7
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Simple knockout by electroporation of engineered endonucleases into intact rat embryos (2014)
  • Author(s): Kaneko T, Sakuma T, Yamamoto T, Mashimo T
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 4 Pages: 6382
  • DOI: 10.1038/srep06382
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Sterol side chain reductase 2 is a key enzyme in the biosynthesis of cholesterol, the common precursor of toxic steroidal glycoalkaloids in potato (2014)
  • Author(s): Sawai S, Ohyama K, Yasumoto S, Seki H, Sakuma T, Yamamoto T, Takebayashi Y, Kojima M, Sakakibara H, Aoki T, Muranaka T, Saito K, Umemoto N
  • Journal Title: Plant Cell Volume: 26 Pages: 3763-3774
  • DOI: 10.1105/tpc.114.130096
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Down syndrome-associated haematopoiesis abnormalities created by chromosome transfer and genome editing technologies (2014)
  • Author(s): Kazuki Y, Yakura Y, Abe S, Osaki M, Kajitani N, Kazuki K, Takehara S, Honma K, Suemori H, Yamazaki S, Sakuma T, Toki T, Shimizu R, Nakauchi H, Yamamoto T, Oshimura M
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 4 Pages: 6136
  • DOI: 10.1038/srep06136
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] EDEM2 initiates mammalian glycoprotein ERAD by catalyzing the first mannose trimming step (2014)
  • Author(s): Ninagawa S, Okada T, Sumitomo Y, Kamiya Y, Kato K, Horimoto S, Ishikawa T, Takeda S, Sakuma T, Yamamoto T, Mori K
  • Journal Title: J Cell Biol Volume: 206 Pages: 347-356
  • DOI: 10.1083/jcb.201404075
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Highly efficient targeted mutagenesis in one-cell mouse embryos mediated by the TALEN and CRISPR/Cas systems (2014)
  • Author(s): Yasue A, Mitsui SN, Watanabe T, Sakuma T, Oyadomari S, Yamamoto T, Noji S, Mito T, Tanaka E
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 4 Pages: 5705
  • DOI: 10.1038/srep05705
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Multiplex genome engineering in human cells using all-in-one CRISPR/Cas9 vector system (2014)
  • Author(s): Sakuma T, Nishikawa A, Kume S, Chayama K, Yamamoto T
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 4 Pages: 5400
  • DOI: 10.1038/srep05400
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Vectors for TALEN- and CRISPR/Cas9-mediated genome editing (2015)
  • Author(s): Tetsushi Sakuma
  • Organizer: 第21回日本遺伝子治療学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2015-07-24 – 2015-07-26
  • Invited
• [Presentation] ゲノム編集の最前線と合成生物学への展開 (2015)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 2015アジレント ゲノミクスフォーラム
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2015-06-16
  • Invited
• [Presentation] Front-line of genome editing technology for animal cell engineering (2015)
  • Author(s): Tetsushi Sakuma
  • Organizer: The 24th Meeting of the European Society for Animal Cell Technology
  • Place of Presentation: Barcelona, Spain
  • Year and Date: 2015-05-31 – 2015-06-03
  • Invited
• [Presentation] Platinum TALENおよびマルチガイドCRISPRシステムを用いたゲノム編集 (2015)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: ゲノム編集マウスワークショップ
  • Place of Presentation: つくば
  • Year and Date: 2015-03-17
  • Invited
• [Presentation] PITCh systems: MMEJ-assisted gene knockin in human cells using TALENs and CRISPR/Cas9 (2015)
  • Author(s): Tetsushi Sakuma, Shota Nakade, Yuto Sakane, Ken-ichi T Suzuki, Takashi Yamamoto
  • Organizer: CRISPR Precision Gene Editing Congress
  • Place of Presentation: MA, USA
  • Year and Date: 2015-02-25 – 2015-02-27
• [Presentation] MMEJ-mediated integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas9 (2015)
  • Author(s): Shota Nakade, Takuya Tsubota, Yuto Sakane, Satoshi Kume, Naoaki Sakamoto, Masanobu Obara, Takaaki Daimon, Hideki Sezutsu, Takashi Yamamoto, Tetsushi Sakuma, Ken-ichi T. Suzuki
  • Organizer: Keystone Symposia: Precision Genome Engineering and Synthetic Biology
  • Place of Presentation: MT, USA
  • Year and Date: 2015-01-11 – 2015-01-16
• [Presentation] Identification of Sterol Side Chain Reductase 2 (SSR2), a Key Enzyme in the Biosynthesis of Cholesterol As the Common Precursor of Toxic Steroidal Glycoalkaloids in Potato (2015)
  • Author(s): Kazuki Saito, Satoru Sawai, Kiyoshi Ohyama, Shuhei Yasumoto, Hikaru Seki, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Yumiko Takebayashi, Mikiko Kojima, Hitoshi Sakakibara, Toshio Aoki, Toshiya Muranaka, Naoyuki Umemoto
  • Organizer: International Plant & Animal Genome XXIII
  • Place of Presentation: CA, USA
  • Year and Date: 2015-01-10 – 2015-01-14
  • Invited
• [Presentation] ゲノム編集の基礎と動物における利用の現状 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 平成26年度日本実験動物技術者協会 関西支部 秋季広島大会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-11-29 – 2014-11-30
  • Invited
• [Presentation] Functional analysis of Oct60 in adult organ formation of Xenopus laevis (2014)
  • Author(s): Naoto Ito, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Tsutomu Kinoshita
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] Gene expression and function of Oct91 during lateral line formation in Xenopus laevis (2014)
  • Author(s): Aya Amakawa, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Tsutomu Kinoshita
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] ゲノム編集技術をもちいた培養精子幹細胞株の遺伝子改変 (2014)
  • Author(s): 佐藤卓也, 佐久間哲史, 片桐久美子, 越後貫成美, 小倉淳郎, 山本 卓, 小川毅彦
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] ゲノム編集によるMMEJを利用した汎用的な遺伝子ノックイン法の確立 (2014)
  • Author(s): 中出翔太, 坂根祐人, 佐久間哲史, 小原政信, 鈴木賢一, 山本 卓
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] マウス胚性幹細胞におけるNanogプロモーターの確率的活性化が発現量の不均一性に影響する (2014)
  • Author(s): 落合 博, 菅原武志, 佐久間哲史, 山本 卓
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] ネフロン前駆細胞特異的レポーター遺伝子を持つiPS細胞の樹立 (2014)
  • Author(s): 賀来祐介, 太口敦博, 佐久間哲史, 山本 卓, 西中村隆一
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] 有用なモデル動物となり得る、イベリアトゲイモリを用いた遺伝子操作法の確立 (2014)
  • Author(s): 林 利憲, 茗荷あゆみ, 佐久間哲史, 亀井保博, 横山 仁, 山本 卓, 竹内 隆
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] グルタミン酸トランスポーターGLASTのヒトレアバリアントは網膜神経節細胞の脆弱性にin vivoで寄与する (2014)
  • Author(s): 今橋里沙, 相田知海, 柳澤美智子, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 山本 卓, 田中光一
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] ヒト紡錘体形成チェックポイント欠損症における細胞増殖に共役した一次繊毛退縮制御の破綻による繊毛病発症機構 (2014)
  • Author(s): 宮本達雄, 細羽康介, 落合 博, Royba Ekaterina, 佐久間哲史, 山本 卓, 松浦伸也
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] 核の凝縮機構の解析ー無細胞アポトーシス系を用いて (2014)
  • Author(s): 刀祢重信, 杉本憲治, 網代廣三, 佐久間哲史, 山本 卓, 栗林 太
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] 機能カセットノックインマウスのためのCRISPR/Casを用いたin vivoゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 相田知海, Keiho Chiyo, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 今橋里沙, 田中謙二, 山本 卓, 田中光一
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] ゲノム編集技術による簡便迅速かつ高効率な次世代染色体工学の開発 (2014)
  • Author(s): 野村 淳, 佐久間哲史, 神田暁史, 岸本恵子, 前田知花, 外丸祐介, 山本 卓, 内匠 透
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] マルチgRNAシステムを用いたCRISPR/Cas9によるゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史, 中出翔太, 西川綾美, 茶山一彰, 鈴木賢一, 山本 卓
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] Transcription activator-like effector nucleases (TALENs)システムを用いて作製したphosphatase and tensin homolog (PTEN)ノックアウトメダカ (2014)
  • Author(s): 松崎ゆり子, 佐久間哲史, 山本 卓, 佐谷秀行
  • Organizer: 第37回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] Front-line of genome engineering technologies (2014)
  • Author(s): Tetsushi Sakuma
  • Organizer: The 27th Annual Meeting of Japanese Association for Animal Cell Technology
  • Place of Presentation: 北九州
  • Year and Date: 2014-11-11 – 2014-11-14
  • Invited
• [Presentation] Analysis of the effect on HBV life cycle by HBV genome editing using TALEN and CRISPR/Cas9 system (2014)
  • Author(s): Hiromi Abe, Tetsushi Sakuma, Masataka Tsuge, Nobuhiko Hiraga, Michio Imamura, Nelson Hayes, Hiroshi Aikata, Takashi Yamamoto, Kazuaki Chayama
  • Organizer: AASLD The Liver Meeting 2014
  • Place of Presentation: MA, USA
  • Year and Date: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [Presentation] Platinum TALENおよびCRISPR/Cas9を用いたゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 第39回日本比較内分泌学会大会
  • Place of Presentation: 岡崎
  • Year and Date: 2014-11-07 – 2014-11-09
  • Invited
• [Presentation] Unliganded thyroid hormone receptor alpha regulates tissue sensitivity and gene repression as revealed by gene knockout in Xenopus tropicalis (2014)
  • Author(s): Jinyoung Choi, Ken-ichi T. Suzuki, Tetsushi Sakuma, Leena Shewade, Takashi Yamamoto, Daniel R. Buchholz
  • Organizer: 6th Great Lakes Nuclear Receptor Conference
  • Place of Presentation: WI, USA
  • Year and Date: 2014-10-17 – 2014-10-18
• [Presentation] Highly efficient targeted mutagenesis in one-cell mouse embryos mediated by TALEN and CRISPR/Cas systems (2014)
  • Author(s): Akihiro Yasue, Silvia N. Mitsui, Takahito Watanabe, Tetsushi Sakuma, Seiichi Oyadomari, Takashi Yamamoto, Sumihare Noji, Taro Mito, Eiji Tanaka
  • Organizer: X Meeting Spanish Society for Developmental Biology
  • Place of Presentation: Madrid, Spain
  • Year and Date: 2014-10-13 – 2014-10-15
• [Presentation] ゲノム編集の基礎と最新動向 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] Platinum TALENおよびCRISPRマルチガイドシステムを用いたゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史, 中出翔太, 坂本尚昭, 鈴木賢一, 山本 卓
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] Duchenne型筋ジストロフィーiPS細胞の遺伝子修復とゲノムワイド変異解析 (2014)
  • Author(s): 李 紅梅, 藤本直子, 笹川典子, 白井紗矢, 大亀登紀子, 佐久間哲史, 田中道廣, 天野直己, 渡辺 亮, 櫻井英俊, 山本 卓, 山中伸弥, 堀田秋津
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ゲノム編集技術による簡便迅速かつ高効率な次世代染色体工学の開発 (2014)
  • Author(s): 野村 淳, 佐久間哲史, 神田暁史, 岸本恵子, 前田知花, 外丸祐介, 山本 卓, 内匠 透
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] CRISPR/Casによるノックインマウス作製の効率化 (2014)
  • Author(s): 相田知海, Keiho Chiyo, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 今橋 里沙, 田中謙二, 山本 卓, 田中光一
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ゲノム編集技術を用いた遺伝子改変ラット作製の現状 (2014)
  • Author(s): 金子武人, 佐久間哲史, 山本 卓, 真下知士
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] CRISPR/Cas9 システムを用いた精巧な遺伝子導入技術の開発 (2014)
  • Author(s): 久野 悠, 佐久間哲史, 太田 聡, 王賀理恵, 岡本 仁, 山本 卓, 川原敦雄
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ツメガエルにおける簡便なノックイン技術の確立:PITChシステム (2014)
  • Author(s): 鈴木賢一, 坂根祐人, 佐久間哲史, 山本 卓
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ゲノム編集のHIVへの応用 (2014)
  • Author(s): 蝦名博貴, 金村優香, 三沢尚子, 佐久間哲史, 小林朋子, 山本 卓, 小柳義夫
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ヒト培養細胞におけるMMEJを利用した汎用的な遺伝子ノックイン法の確立 (2014)
  • Author(s): 中出翔太, 佐久間哲史, 坂本尚昭, 鈴木賢一, 山本 卓
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] 一塩基置換導入法による高発がん性遺伝病の変異の特定 (2014)
  • Author(s): 落合 博, 宮本達雄, 佐久間哲史, 山本 卓, 松浦伸也
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ゲノム編集技術をもちいた培養精子幹細胞株の遺伝子改変法の開発 (2014)
  • Author(s): 佐藤卓也, 佐久間哲史, 片桐久美子, 越後貫成美, 小倉淳郎, 山本 卓, 小川毅彦
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] 糸状菌型Platinum TALENの作製とイネいもち病菌(糸状菌)における高効率遺伝子改変 (2014)
  • Author(s): 荒添貴之, 小川哲央, 大里修一, 佐久間哲史, 山本 卓, 有江 力, 桑田 茂
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] TALENを用いた麹菌Aspergillus oryzaeにおけるゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 水谷 治, 荒添貴之, 利田賢次, 林 梨咲, 大里修一, 佐久間哲史, 山本 卓, 桑田 茂, 山田 修
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] TALENを用いたジャガイモグリコアルカロイド生合成酵素遺伝子の破壊 (2014)
  • Author(s): 安本周平, 關 光, 澤井 学, 大山 清, 梅基直行, 佐久間哲史, 山本 卓, 斉藤和希, 村中俊哉
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ミジンコ（Daphnia pulex）におけるPlatinum TALENを用いた標的遺伝子破壊法の確立 (2014)
  • Author(s): 蛭田千鶴江, 荻野由紀子, 佐久間哲史, 豊田賢治, 山本 卓, 井口泰泉
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] Increased or decreased expression of the ladybird bomeobox1 causes scoliosis in zebrafish (2014)
  • Author(s): Long Guo, Hiroshi Yamashita, Tetsushi Sakuma, Ikuyo Kou, Aki Takimoto, Takashi Yamamoto, Taiji Adachi, Yuji Hiraki, Shiro Ikegawa, Chisa Shukunami
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] TALENを用いたメダカの環境依存的性決定機構の解析 (2014)
  • Author(s): 竹中亨彰, 濱崎 心, 内村友哉, 長船奈津美, 高木久徳, 佐久間哲史, 山本 卓, 北野 健
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] アフリカツメガエルにおけるTALENを用いた標的遺伝子の改変 (2014)
  • Author(s): 坂根祐人, 佐久間哲史, 鈴木美有紀, 柏木啓子, 柏木昭彦, 坂本尚昭, 山本 卓, 鈴木賢一
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] In vivo monitoring of histone H3 lysine 9 acetylation using Mintbody transgenic Xenopus laevis during embryogenesis and tail regeneration (2014)
  • Author(s): 鈴木美有紀, 坂根祐人, 佐久間哲史, 坂本尚昭, 山本 卓, 鈴木賢一
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] ゲノム編集技術を用いた鳥類性決定関連遺伝子の解析 (2014)
  • Author(s): 枡岡久子, 中川祐樹, 江崎 僚, 佐久間哲史, 黒岩麻里, 山本 卓, 堀内浩幸
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] TALENによる効率的な遺伝子破壊マウスの作製―体外受精により得られた凍結受精卵の使用と採卵に用いる雌マウスの週齢検討― (2014)
  • Author(s): 中川佳子, 佐久間哲史, 中潟直己, 大村谷昌樹, 山本 卓
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] Platinum TALENによる高速・高効率なノックインマウス作製とヒトゲノム多様性の個体レベルでの機能解釈 (2014)
  • Author(s): 今橋里沙, 相田知海, 柳澤美智子, 佐久間哲史, 宇佐美貴子, 石久保春美, 山本 卓, 田中光一
  • Organizer: 第4 回ゲノム編集研究会
  • Place of Presentation: 広島
  • Year and Date: 2014-10-06 – 2014-10-07
• [Presentation] 高活性型Platinum TALENを用いたゲノム編集 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 第1回KBRPワークショップ
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2014-10-03
  • Invited
• [Presentation] Unliganded thyroid hormone receptor alpha regulates gene repression and developmental timing as revealed by gene knockout in Xenopus tropicalis (2014)
  • Author(s): Jinyoung Choi, Ken-ichi Suzuki, Tetsushi Sakuma, Leena Shewade, Takashi Yamamoto, Daniel R. Buchholz
  • Organizer: 15th International Xenopus Conference
  • Place of Presentation: CA, USA
  • Year and Date: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [Presentation] Genome editing reveals a novel function of keratin in fin formation in X. laevis (2014)
  • Author(s): Ken-ichi T. Suzuki, Keiko Kashiwagi, Tetsushi Sakuma, Akihiko Kashiwagi, Makoto Mochii, Takashi Yamamoto
  • Organizer: 15th International Xenopus Conference
  • Place of Presentation: CA, USA
  • Year and Date: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [Presentation] Targeted mutagenesis of multiple and paralogous genes in Xenopus laevis using two pairs of TALENs (2014)
  • Author(s): Yuto Sakane, Tetsushi Sakuma, Keiko Kashiwagi , Akihiko Kashiwagi, Takashi Yamamoto, Ken-ichi T Suzuki
  • Organizer: 15th International Xenopus Conference
  • Place of Presentation: CA, USA
  • Year and Date: 2014-08-24 – 2014-08-28
• [Presentation] Stochastic promoter activation affects gene expression variability in murine embryonic stem cells (2014)
  • Author(s): Hiroshi Ochiai, Takeshi Sugawara, Ken-ichi Suzuki, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto
  • Organizer: Cold Spring Harbor Laboratory Conference
  • Place of Presentation: NY, USA
  • Year and Date: 2014-08-19 – 2014-08-23
• [Presentation] Genome editing using Platinum TALENs (2014)
  • Author(s): Tetsushi Sakuma, Ken-ichi Suzuki, Takashi Yamamoto
  • Organizer: FASEB Science Research Conference: Genome Engineering - Cutting-Edge Research and Applications
  • Place of Presentation: Nassau, Bahamas
  • Year and Date: 2014-06-22 – 2014-06-27
• [Presentation] Ultra-rapid and highly efficient in vivo genome editing in mice (2014)
  • Author(s): Tomomi Aida, Tetsushi Sakuma, Takako Usami, Harumi Ishikubo, Risa Imahashi, Keiho Chiyo, Pawel Obrocki, Takashi Yamamoto, Kohichi Tanaka
  • Organizer: FASEB Science Research Conference: Genome Engineering - Cutting-Edge Research and Applications
  • Place of Presentation: Nassau, Bahamas
  • Year and Date: 2014-06-22 – 2014-06-27
• [Presentation] ゲノム編集の原理と基礎知識 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史
  • Organizer: 第66回日本細胞生物学会大会
  • Place of Presentation: 奈良
  • Year and Date: 2014-06-11 – 2014-06-13
  • Invited
• [Presentation] Knockout of genes in the chordate Ciona intestinalis (2014)
  • Author(s): Nicholas Treen, Haruka Sasaki, Keita Yoshida, Akiko Hozumi, Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto, Yasunori Sasakura
  • Organizer: 第47回日本発生生物学会
  • Place of Presentation: 愛知
  • Year and Date: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [Presentation] TALEN-mediated genome editing is very useful in Iberian ribbed newts (Pleurodeles waltl), an experimental model animal for regeneration (2014)
  • Author(s): Toshinori Hayashi, Kousuke Sakamoto, Tetsushi Sakuma, Ayumi Myouga, Naoki Yokotani, Takeshi Inoue, Eri Kawaguchi, Kiyokazu Agata, Takashi Yamamoto, Takashi Takeuchi
  • Organizer: 第47回日本発生生物学会
  • Place of Presentation: 愛知
  • Year and Date: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [Presentation] Targeted genome editing using Platinum TALENs (2014)
  • Author(s): Takashi Yamamoto, Kenichi Suzuki, Tetsushi Sakuma
  • Organizer: 第47回日本発生生物学会
  • Place of Presentation: 愛知
  • Year and Date: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [Presentation] A new strategy for gene knock-in in Xenopus laevis using Platinum TALENs (2014)
  • Author(s): Yuto Sakane, Tetsushi Sakuma, Miyuki Suzuki, Takashi Yamamoto, Ken-ichi Suzuki
  • Organizer: 第47回日本発生生物学会
  • Place of Presentation: 愛知
  • Year and Date: 2014-05-27 – 2014-05-30
• [Book] Targeted Genome Editing Using Engineered Nucleases: ZFNs, TALENs, and the CRISPR/Cas9 System (2015)
  • Author(s): Sakuma T, Yamamoto T (Yamamoto T, ed.)
  • Total Pages: 205
  • Publisher: Springer Japan
• [Book] 実験医学別冊「今すぐ始めるゲノム編集」 (2014)
  • Author(s): 佐久間哲史（山本卓 編）
  • Total Pages: 205
  • Publisher: 羊土社
• [Remarks] 広島大学 分子遺伝学研究室
  • URL: http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/index.html