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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Formation mechanisms for cellular protrusions and their physiological functions

Research Project

Project/Area Number 26291037
Research InstitutionNara Institute of Science and Technology

Principal Investigator

末次 志郎  奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (70345031)

Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords細胞生物学
Outline of Annual Research Achievements

YPELについて、いくつかのYPEL抗体を検討したところ、内在性のタンパク質の検出に成功した。この抗体を用いて、免疫染色を行なったところ、内在性のCIP4やPACSIN2との共局在の観察に成功した。また免疫沈降実験により内在性タンパク質同士の会合を確認した。さらにsiRNAによる発現抑制実験を行い、CIP4やPACSIN2の局在する膜構造の形状が変化することを確かめた。これらのことから、確かにYPELはCIP4やPACSIN2の局在や機能を制御していることが示唆された。一方タンパク質発現系については、発現量の改善は見られず、今後結合部位の同定や可溶化のための変異体作成を進める予定である。
GAS7について、全長の構造より立体構造を決定したものの、これまでに決定できたドメイン以外は構造決定できなかった。変異体解析の結果、凹面の膜結合面を持っていることがわかった。結合タンパク質を酵母2-ハイブリッド法により同定し、実際の結合を共沈実験及び発現タンパク質の共局在により観察した。現在、これらのタンパク質がGAS7の脂質膜への結合などの機能にどのように関与しているか解析している。マクロファージのGAS7ノックアウト株を作成し、GAS7の機能を調べたところ、ファゴサイトーシスカップの形成に関与していることが示唆された。ファゴサイトーシスカップは突出膜様の構造であり、凹面の膜結合面を持つBARタンパク質が機能することは非常に興味深い。また超解像解析を行い、ファゴサイトーシスにおけるGAS7の局在を詳しく調べている。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (11 results)

All 2017 2016 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 8 results,  Invited: 6 results)

  • [Int'l Joint Research] MDC(Germany)

    • Country Name
      Germany
    • Counterpart Institution
      MDC
  • [Journal Article] Higher-order assemblies of BAR domain proteins for shaping membranes.2016

    • Author(s)
      Suetsugu S.
    • Journal Title

      Microscopy (Oxf)

      Volume: 65 Pages: 201-210

    • DOI

      10.1093/jmicro/dfw002

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Yeast Ivy1p Is a Putative I-BAR-domain Protein with pH-sensitive Filament Forming Ability in vitro.2016

    • Author(s)
      Itoh Y, Kida K, Hanawa-Suetsugu K, Suetsugu S.
    • Journal Title

      Cell Struct Funct.

      Volume: 41 Pages: 1-11

    • DOI

      10.1247/csf.15014.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] BARドメインタンパク質の立体構造と ファゴサイトーシスにおける機能2017

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      第122回 日本解剖学会
    • Place of Presentation
      長崎大学(長崎県長崎市)
    • Year and Date
      2017-03-29
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] BARドメインタンパク質の立体構造と ファゴサイトーシスにおける機能2017

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      第137回 日本薬学会年会
    • Place of Presentation
      仙台国際センター(宮城県仙台市)
    • Year and Date
      2017-03-25
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Yeast Ivy1p is a putative I-BAR-domain protein with pH-sensitive filament forming ability in vitro2016

    • Author(s)
      Yuzuru Itoh, Kazuki Kida, Kyoko Hanawa-Suetsugu, Shiro Suetsugu
    • Organizer
      American Society for Cell Biology
    • Place of Presentation
      モスコーネセンター(サンフランシスコ市、アメリカ)
    • Year and Date
      2016-12-06
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] BARタンパク質による細胞膜の形態形成とファゴサイトーシスの関連2016

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      第54回生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場(茨城県つくば市)
    • Year and Date
      2016-11-25
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Regulation of caveolar morphology by the F-BAR domain protein PACSIN2/Syndapin II2016

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      XXII Biennial Meeting of the International Society for Eye Research
    • Place of Presentation
      京王プラザホテル(東京都新宿区)
    • Year and Date
      2016-09-28
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] BARタンパク質による細胞膜の形態形成とファゴサイトーシスの関連2016

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      第89回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      仙台国際センター(宮城県仙台市)
    • Year and Date
      2016-09-25
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] カドヘリンの局在化における I-BARタンパク質IRSp53の役割2016

    • Author(s)
      多羅尾賢斗、塙京子、末次志郎
    • Organizer
      第68回日本細胞生物学会大会
    • Place of Presentation
      京都テルサ(京都府京都市)
    • Year and Date
      2016-06-17
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] BARタンパク質による細胞膜の形態形成2016

    • Author(s)
      末次志郎
    • Organizer
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場(福岡県福岡市)
    • Year and Date
      2016-06-07
    • Int'l Joint Research / Invited

URL: 

Published: 2021-01-27  

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