Real-time monitoring of the oxidative stress in brain induced by occlusal disharmony

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26293441
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 森田 学 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (40157904)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 江國 大輔 岡山大学, 大学病院, 講師 (70346443) ; 友藤 孝明 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (80335629) ; 東 哲司 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (80432649)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 咬合異状 / 酸化ストレス

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、酸化ストレス可視化マウス（Tg型OKD-Lucマウス）において咬合異常モデルを作成し、咬合異常によって生じた酸化ストレスの詳細と、それをコントロールする方策を探る研究である。
初年度は、8週齢の酸化ストレス可視化マウスを用いて、咬合異常群と対照群に分けた。その結果、対照群と比較して、咬合異常群では酸化ストレスの指標であるNrf2の遺伝子発現が増加した。しかし、脳や口腔内局所の可視化は困難で、その測定条件（色素量、タイミング、測定条件）を変化させて実験したが、再現性のある結果は得られかった。そこで、前年度は、測定条件を様々に変化させ、より敏感な測定方法を得るべく改良を重ねた。
最終年度は、前年度で得られた測定条件で実験を行った。8週齢の酸化ストレス可視化マウスを用いて、咬合異常群と咬合異常＋水素水群に分けた。咬合異常＋水素水群には、ベースライン時に咬合異常を惹起するとともに、水素水（3ppm、自由飲水、水素水サーバー：SEEMS Bionics Inc.）を同時に飲水させた。削合直後及び、１，２、4週後のルシフェラーゼ活性（酸化ストレス状態の指標）をルミノメーターで測定した。4週後、マウスを屠殺して脳組織を採取した。トリゾールを用いて、mRNAを抽出後、リアルタイムPCRで、HO-1遺伝子（Nrf2の下流に位置する酸化ストレス防御遺伝子）の発現を比較検討した。その結果、採取された脳において、咬合異常群と咬合異常＋水素水群ではHO-1の発現量に大きな違いが認められなかった。ルシフェラーゼ活性による単位面積当たりの発光を比較したところ、咬合異常＋水素水群では1週後に減少する傾向が認めらた。しかし、4週目には咬合異常群と咬合異常＋水素水群では大きな違いが認められなかった。
以上のことから、水素水による抗酸化作用は一過性である可能性が示唆された。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

28年度が最終年度であるため、記入しない。