2015 Fiscal Year Research-status Report
内在リガンド認識性抑制型C型レクチン受容体の生理機能と疾患関連の解明
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26430095
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| Research Institution | Tokyo University of Science |
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Principal Investigator |
海部 知則 東京理科大学, 研究推進機構生命医科学研究所, 助教 (90343037)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩倉 洋一郎 東京理科大学, 研究推進機構生命医科学研究所, 教授 (10089120)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | C型レクチン受容体 / DCIR / リガンド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
C型レクチン受容体は生体防御機構を担う重要な分子群であるが、免疫応答を調節する受容体であることが明らかになりつつある。特に、我々が注目しているITIMモチーフを持つは抑制型C型レクチン受容体は、免疫応答を負に調節し免疫システムの恒常性維持に重要な分子として機能している。このように、C型レクチン受容体は多彩な機能を持ったユニークな分子であることから、C型レクチン受容体の機能理解は複雑な生体システムの包括的理解につながると考えられる。
DCIRはITIMモチーフを持つC型レクチン受容体のひとつであり、その制御破綻が疾患発症につながることがDCIR遺伝子欠損マウスの解析から明らかになった。DCIRを介した制御破綻は様々な疾患の発症、病態形成に関与すると考えられるが、どのような疾患と関連するのか、詳細は明らかではない。また、DCIRと同様にITIMモチーフを持つClec12aは免疫システム制御に関与することが期待される。実際、Clec12a欠損マウスは炎症増悪化を示すことが報告されたが、自己免疫疾患等の疾患との関わりは不明である。
そこで、DCIRやClec12a等の抑制型C型レクチン受容体と疾患との関連性、病態形成機序を明らかにすることを目的とする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
DSSの病態増悪化とDCIRとの関連を検討した。また、DCIR欠損/Rag2欠損マウスを用いて、DSSの病態形成における免疫系細胞の関与を調べた。さらに、DCIRDCIR-Fcを用いて脾臓組織におけるDCIRリガンドの発現パターンを検討した。
Clec12a遺伝子欠損マウスの作製はターゲティングベクター法からCRISPR/Cas9法を用いたゲノム編集技術を用いた遺伝子改変マウスの作製に変更した。gRNAを作製し遺伝子改変マウスの産出を試みている。その際、従来用いられているインジェクション法に変えてより簡単なエレクトロポレーション法で実施した。現在、ターゲット遺伝子の配列を確認している。
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| Strategy for Future Research Activity |
前年度に引き続きClec12a遺伝子欠損マウスの作製を実施する。Cre-loxpによるコンディショナルノックアウトマウスを作製するためにターゲティングベクターを作製する。
DCIR/リガンド相互作用による細胞制御機構を明らかにするために、in vitroの系を用いてリガンド存在下での細胞機能を解析する。
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| Causes of Carryover |
Clec12a欠損マウスの完成時期がずれたために、遺伝子改変マウス解析に使用予定であった物品費を残金として次年度に繰り越しをした。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
遺伝子改変マウスの作製、ターゲティングベクター作製ならびに遺伝子改変マウスの表現型解析のために物品費、その他として使用する。また、細胞培養に使用するCO2インキュベーターを購入予定である。
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