ＨＴＬＶ－１、ＥＢＶ関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的ＣＴＬの病態解析

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26460446
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 大島 孝一 久留米大学, 医学部, 教授 (50203766)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: HTLV-1 / ATLL / TAX / CTL / HLA-A24 / Foxp3

Outline of Annual Research Achievements

HTLV-1ウイルス蛋白であるTAXは、成人T細胞白血病/リンパ腫(ATLL)細胞の増殖に重要な役割を果たし、かつHTLV-1-specific Cytotoxic T lymphocyte(CTL)の標的でもあることが知られている。しかし、HTLV-1-specific CTLがATLL患者のリンパ節の中でどのように作用するかは明らかではない。そこで現在、ATLLの患者のリンパ節検体を用いて、HLA-A24-restricted TAX-specific CTLの蛍光染色を行い、腫瘍のHLA-A24、TAX、Foxp3の発現との関係を検討している。
方法：Assay 1:ATLL患者のリンパ節病変にTax-specific CTLはいるのか？PCR法にて、HLA-A24を確認したATLLのFrozen sectionを用いて、MHC dextramerによりHLA-A24 restricted　TAX-specific CTLを蛍光染色を行っている。Tax-specific CTLとFOXｐ３の関係を解析するため、抗FOXｐ３抗体（Abcam）を使用し免疫染色を行っている。また、Tax-specific CTLの活性をみるため、INFγの免疫染色を行っている。その結果、部の症例で、ATLLのリンパ節病変内にはTax-specific CTLが認められている。また、Tax-specific CTL数は、形態との関連はみられなかったが、FOXｐ3陽性の症例では優位に低い傾向がみられたが、現在、症例の追加を行い解析を継続中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ＨＴＬＶ－１関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的ＣＴＬの病態解析：今回の研究にあたり以下の方法：方法1,2,3は、確立できたため、今後は症例の選定、追加を行う予定をしている。
方法1) ATLL患者のリンパ節病変にTax-specific CTLはいるのかを確認するため、PCR法にて、HLA-A24を確認したATLLのFrozen sectionを用いて、MHC dextramerによりHLA-A24 restricted　TAX-specific CTLを蛍光染色を行っている。方法2) Tax-specific CTLとFOXｐ３の関係を解析するため、抗FOXｐ３抗体（Abcam）を使用し免疫染色を行っている。方法3) Tax-specific CTLの活性をみるため、INFγの免疫染色を行っている。

Strategy for Future Research Activity

ＨＴＬＶ－１関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的ＣＴＬの病態解析については上記のように、今後は症例の選定、追加を行う予定をしている。
ＥＢＶ関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的ＣＴＬの病態解析においては、まだ、開始を行っていないが、びまん大細胞型リンパ腫において、免疫逃避タンパクPDL-1および、その作用タンパクであるPD1の解析とEBVの感染の関連を解析予定にしており、現在、症例の選定を行っている。また、PDL-1, PD1の免疫染色については、方法は、現在確定している。

Research Products

• [Journal Article] Epstein-Barr virus is rarely associated with diffuse large B cell lymphoma in Taiwan and carries a trend for a shorter median survival time. (2014)
  • Author(s): Chang ST, Lu YH, Lu CL, Weng SF, Lin SH, Kuo SY, Chuang YT, Takeuchi K, Ohshima K, Chuang SS.
  • Journal Title: J Clin Pathol Volume: 67 Pages: 326-32
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] MicroRNA-150 inhibits tumor invasion and metastasis by targeting the chemokine receptor CCR6, in advanced cutaneous T-cell lymphoma. (2014)
  • Author(s): Ito M, Teshima K, Ikeda S, Kitadate A, Watanabe A, Nara M, Yamashita J, Ohshima K, Sawada K, Tagawa H.
  • Journal Title: Blood Volume: 123 Pages: 1499-511
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Loss of NDRG2 expression activates PI3K-AKT signalling via PTEN phosphorylation in ATLL and other cancers. (2014)
  • Author(s): Nakahata S, Ichikawa T, Maneesaay P, Saito Y, Nagai K, Tamura T, Manachai N, Yamakawa N, Hamasaki M, Kitabayashi I, Arai Y, Kanai Y, Taki T, Abe T, Kiyonari H, Shimoda K, Ohshima K, Horii A, Shima H, Taniwaki M, Yamaguchi R, Morishita K.
  • Journal Title: Nat Commun Volume: 26 Pages: 3393
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Gene expression profiling of Epstein-Barr virus-positive diffuse large B-cell lymphoma of the elderly reveals alterations of characteristic oncogenetic pathways. (2014)
  • Author(s): Kato H, Karube K, Yamamoto K, Takizawa J, Tsuzuki S, Yatabe Y, Kanda T, Katayama M, Ozawa Y, Ishitsuka K, Okamoto M, Kinoshita T, Ohshima K, Nakamura S, Morishima Y, Seto M.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 105 Pages: 537-44
  • Peer Reviewed