2015 Fiscal Year Research-status Report
再生胸腺移植を併用した新しい骨髄移植法による癌治療
Project/Area Number |
26460498
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Research Institution | Kansai Medical University |
Principal Investigator |
保坂 直樹 関西医科大学, 医学部, 講師 (30388459)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大江 知里 関西医科大学, 医学部, 助教 (40469242) [Withdrawn]
神田 靖士 関西医科大学, 医学部, 准教授 (70295799)
池原 進 関西医科大学, 医学部, 教授 (90108986) [Withdrawn]
下埜 敬紀 関西医科大学, 医学部, 助教 (40632625)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | 胸腺 / T細胞 / 再生 |
Outline of Annual Research Achievements |
研究の全体構想は、再生胸腺移植(thymus transplantation, TT)を併用した新しいアロ骨髄移植法(Bone marrow transplantation, BMT)を開発する事である。そのためにまずマウス人工性多能性幹 (mouse induced Pluripotent Stem, miPS) 細胞から胸腺上皮細胞の誘導を試みた。その方法はin vitroにてmiPS細胞をLiCl, Activin A, Fibroblast growth factor (FGF)7, FGF8, FGF10, Bone morphogenetic protein (BMP)4の存在下に培養するもので、2週後に形態及び転写因子の発現を調べた。結果は上皮様の紡錘形細胞が誘導され、転写因子はKeratin (K)5, K8, Foxn-1, Fibroblast growth factor Receptor (FGFR)2, E-cadherin, autoimmune regulator (AIRE), Plet-1, Pax-1, Pax-9, Dll1, Dll4,Snap-1, Eya-1, Hoxa3, Six-1の発現が認められた。さらに3週目にはI-Aの発現が見られた。この間Nanogoの発現は減少し、CD3の発現は見られなかった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
miPS細胞は継代をしながら使用しているが、途中から分化が不安定になってきた。未分化状態が維持できなくなってきた可能性があり、初期の継代細胞からまた実験を開始した。するとまた分化が上手く行くようになったが、その間に時間を要した。
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Strategy for Future Research Activity |
次に胸腺上皮細胞の機能分子の発現を、フローサイトメトリー、或は免疫染色にて蛋白レベルで調べて行く。これらが確認できれば、実際に本細胞が造血幹細胞からT細胞を誘導するか調べて行く。同様の事をin vivoでも行う。またT細胞以外の細胞も誘導されるか調べる。
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Causes of Carryover |
一時期miPS細胞からの分化誘導実験が上手くいかず、継代培養を最初から行った。その為に、次の実験の試薬を買わなかった。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
分化誘導実験が上手く行くようになったので、次の年に使用して試薬を購入する。
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