2014 Fiscal Year Research-status Report
トキソプラズマ性網脈絡膜炎のプロテオーム解析―バイオマーカーの探索―
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26460505
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
野呂瀬 一美 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30156244)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 守 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (20401002)
日和佐 隆樹 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30260251)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | トキソプラズマ性網脈絡膜炎 / プロテオーム / バイオマーカー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
トキソプラズマ症は発展途上国のみならず欧米や日本にも分布する重要な先進国型原虫症の一つで感染者数は世界で５億人と推計され、我が国では年齢x(0.1-1)%の感染率を示す。トキソプラズマ性網脈絡膜炎（本症）は原虫トキソプラズマ感染により免疫特権部位の眼に発症する失明に至る疾患であり、特に新生児から思春期までのブドウ膜炎の原因としては第一位を占め、重大な疾患の一つである。トキソプラズマ感染症が日和見感染症であるため、血清中抗体価や原虫遺伝子の検出のみでは本症は確定診断できず、早期治療の時期を逸することが多々報告されている。そこで今回、本症発症に関与するタンパク質を網羅的に解析することにより、微量検体量でかつ高精度で診断できる新規のバイオマーカ―の開発や分子標的治療に資するタンパク質の探索を目的として研究を行っている。
今年度はトキソプラズマ感受性野生型マウス（WT C57BL/6マウス）にトキソプラズマを経口感染させ、４週間後に眼底カメラで眼底を観察し、感染成立の有無を確認し、心臓よりPBS潅流後、眼球摘出し網膜を剥離し、蛋白質を抽出した。抽出したたんぱく質を２次元電気泳動し、クマーシブルーで染色後、画像解析を行い、多数の蛋白質スポットを得た。
現在、感染前後で発現の差が２倍以上で有意差が0.05以下の蛋白質に焦点を当て、ゲル内消化を行い、液体クロマトグラフ・タンデム型質量分析計(LC-MS/MS)で測定後データベース検索で蛋白質の同定を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウスの個体差、あるいは、網膜の摘出の際に網膜色素上皮が網膜に付着するがその度合いの差のためか、2次元電気泳動のスポットにばらつきがみられる。そのため、解析に時間がかかっている。
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| Strategy for Future Research Activity |
二次元電気泳動のスポットのばらつきを解決するため、多くのマウスで同様の実験を繰り返す。
眼球から前房水及び硝子体を採取し、同様の手技でバイオマーカー候補蛋白質を検出・定量する。
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[Journal Article] Elevated serum antibody levels against cyclin L2 in patients with esophageal squamous cell carcinoma.2015
Author(s)
Shimada H, Ito M, Kagaya A, Shiratori T, Kuboshima M, Suzuki M, Liu TL, Nabeya Y, Matsubara H, Matsushita K, Nomura F, Takiguchi M, Hiwasa T
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Journal Title
J Cancer Sci Ther
Volume: 7(2)
Pages: 60-66
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Successful treatment of toxoplasmic encephalitis rapidly diagnosed by a polymerase chain reaction after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: two cases reports and a review of the literature.2015
Author(s)
Miyagi T, Itonaga H, Aosai F, Taguchi J, Norose K, Mochizuki K, Fujii H, Furumoto A, Ohama M, Karimata K , Yamanoha A, Taniguchi H, Sato S , Taira N, Moriuchi Y, Fukushima T, Masuzaki H, Miyazaki Y.
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Journal Title
Transplant Infect Dis
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Identification of Cerebral Infarction-Specific Antibody Markers from Autoantibodies Detected in Patients with Systemic Lupus Erythematosus.2015
Author(s)
Goto K, Sugiyama T, Matsumura R, Zhang XM, Kimura R, Taira A, Arita E, Iwase K, Kobayashi E, Iwadate Y, Saeki N, Mori M, Uzawa A, Muto M, Kuwabara S, Takemoto M, Kobayashi K, Kawamura H, Ishibashi R, Sakurai K, et al
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Journal Title
J. Mol. Biomark. Diagnos.
Volume: 6
Pages: 2
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Urinary albumin and transferrin as early diagnostic markers of chronic kidney disease.2015
Author(s)
Maeda H, Sogawa K, Sakaguchi K, Abe S, Sagizaka W, Mochizuki S, Horie W, Watanabe T, Shibata Y, Satoh M, Sanda A, Nomura F, Suzuki J
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Journal Title
J Vet Med Sci.
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Haploinsufficiency of the c-myc transcriptional repressor FIR, as a dominant negative-alternative splicing model, promoted p53-dependent T-cell acute lymphoblastic leukemia progression by activating Notch12015
Author(s)
Matsushita K, Kitamura K, Rahmutulla B, Tanaka N, Ishige T, Satoh M, Hoshino T, Miyagi S, Mori T, Itoga S, Shimada H, Tomonaga T, Kito M, Nakajima-Takagi Y, Kubo S, Nakaseko C, Hatano M, Miki T, Matsuo M, Fukuyo M, Kaneda A, Iwama A, Nomura F
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Journal Title
Oncotarget.
Volume: 6
Pages: 5102-5117
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Increased cell proliferation and differential protein expression induced by low-level Er:YAG laser irradiation in human gingival fibroblasts: proteomic analysis.2014
Author(s)
Ogita M, Tsuchida S, Aoki A, Satoh M, Kado S, Sawabe M, Nanbara H, Kobayashi H, Takeuchi Y, Mizutani K, Sasaki Y, Nomura F, Izumi Y
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Journal Title
Lasers Med Sci.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Moesin is a possible target molecule for cytomegalovirus-related Guillain-Barre syndrome.2014
Author(s)
Sawai S, Satoh M, Mori M, Misawa S, Sogawa K, Kazami T, Ishibashi M, Beppu M, Shibuya K, Ishige T, Sekiguchi Y, Noda K, Sato K, Matsushita K, Kodera Y, Nomura F, Kuwabara S
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Journal Title
Neurology.
Volume: 83
Pages: 113-117
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Alternative splicing of FBP-interacting repressor coordinates c-Myc, P27Kip1/cyclinE and Ku86/XRCC5 expression as a molecular sensor for bleomycin-induced DNA damage pathway.2014
Author(s)
Rahmutulla B, Matsushita K, Satoh M, Seimiya M, Tsuchida S, Kubo S, Shimada H, Ohtsuka M, Miyazaki M, Nomura F.
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Journal Title
Oncotarget
Volume: 5
Pages: 2404-2417
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Direct application of MALDI-TOF mass spectrometry to cerebrospinal fluid for rapid pathogen identification in a patient with bacterial meningitis.2014
Author(s)
Segawa S, Sawai S, Murata S, Nishimura M, Beppu M, Sogawa K, Watanabe M, Satoh M, Matsutani T, Kobayashi M, Iwadate Y, Kuwabara S, Saeki N, Nomura F
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Journal Title
Clin Chim Acta
Volume: 435
Pages: 59-61
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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