2015 Fiscal Year Research-status Report
トキソプラズマ性網脈絡膜炎のプロテオーム解析―バイオマーカーの探索―
Project/Area Number |
26460505
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Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
野呂瀬 一美 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30156244)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 守 千葉大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (20401002)
日和佐 隆樹 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30260251)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | プロテオソーム / トキソプラズマ性網脈絡膜炎 / 前房水 / 硝子体液 / バイオマーカー |
Outline of Annual Research Achievements |
細胞内寄生体であるトキソプラズマに感染すると免疫正常者では脳、眼、筋肉等にシストを形成するのみで、ほとんど無症状であるが、宿主が免疫抑制状態に陥ると重篤な症状を引き起こすことが知られている。眼は免疫特権部位であり、網膜の微細な病変でも視機能に重大な影響を及ぼし特に小児でのブドウ膜炎の原因としてトキソプラズマ性網脈絡膜炎が第一位となっている。しかしながら、日和見感染症であることから、確定診断や病態把握が困難である。 今回の研究の目的は、トキソプラズマ性網脈絡膜炎発症に関与する蛋白質を網羅的に解析することにより微量検体量でかつ高精度で診断できる新規のバイオマーカーの開発や分子標的治療に資する蛋白質を探索することである。 一年目はトキソプラズマをトキソプラズマ感受性マウスに感染させ2週間後及び4週間後に眼底カメラで眼底を観察し感染成立の有無を確認し眼球摘出後網膜を剥離し蛋白質を抽出し2次元電気泳動を行い、画像解析の結果多数の蛋白質スポットを得た。 二年目は一年目で得られた蛋白質スポットの内、感染前後で発現の差が2倍以上の蛋白質を切り出し、ゲル内消化を行い、液体クロマトグラフ・タンデム型質量分析計(LC-MS/MS)で測定しデータベース検索の結果、感染後に2倍以上上昇した8種類、2倍以上減少した45種類の蛋白質を同定した。 また、前房水及び硝子体中のバイオマーカーを探索するべく、感染前後の前房水及び硝子体液、血清、髄液を約100匹のマウスから採取し凍結させており、今後、各種サイトカイン、ケモカイン等の濃度を測定する予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウスの眼球から前房水や硝子体液、またマウス脊髄腔から髄液を採取するのに技術的な問題があり、時間がかかっている。これらの体液は一匹のマウスから数マイクロリッターしか採取できず、解析に必要な量を得るのに各群約100匹のマウスが必要であることも進捗が遅れている理由となっている。
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Strategy for Future Research Activity |
トキソプラズマ感染前後のマウス(各々約100匹)から前房水、髄液、血清をすでに凍結保存してあるので、各種サイトカイン、ケモカイン等の解析を行う。
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Causes of Carryover |
購入試薬の値段が予定より安価であったため、当初計画で割り当てていた使用額との差額が生じた。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
文房具の購入に充てたい。
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Research Products
(27 results)
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[Journal Article] Forensic study of Schistosoma japonicum eggs found in an autopsy case.2016
Author(s)
Motomura A, Norose K, Hoshioka Y, Torimitsu S, Chiba F, Makino Y, Inokuchi G, Yajima D, Ohta N, Kumagai T, Iwase H
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Journal Title
Parasitol Int
Volume: 65(3)
Pages: 285-287
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Elevated adiponectin antibody levels in sera of patients with atherosclerosis-related coronary artery disease, cerebral infarction, and diabetes mellitus.2016
Author(s)
Hiwasa T, Zhang XM, Kimura R, Ohno M, Chen PM, Nishi E, Ono K, Kimura T, Kamitsukasa I, Wada T, Aotsuka S, Mine S, Takizawa H, Kashiwado K, Takemoto M, Kobayashi K, Kawamura H, Ishibashi R, Yokote K, Nakamura R, Tomiyoshi G, Shinmen N, Kuroda H
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Journal Title
J Circ Biomark
Volume: 5
Pages: 8
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Identification of cerebral infarction-specific antibody markers from autoantibodies detected in patients with systemic lupus erythematosus.2015
Author(s)
Goto K, Sugiyama T, Matsumura R, Zhang XM, Kimura R, Taira A, Arita E, Iwase K, Kobayashi E, Iwadate Y, Saeki N, Mori M, Uzawa A, Muto M, Kuwabara S, Takemoto M, Kobayashi K, Kawamura H, Ishibashi R, Sakurai K, Fujimoto M, Yokote K, Nakayama T, Harada J, Kobayashi Y, Ohno M, Chin H, ....., Hiwasa T.
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Journal Title
J Mol Biomark Diagnos
Volume: 6
Pages: 2
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Elevated serum antibody levels against cyclin L2 in patients with esophageal squamous cell carcinoma.2015
Author(s)
Shimada H, Ito M, Kagaya A, Shiratori T, Kuboshima M, Suzuki M, Liu TL, Nabeya Y, Matsubara H, Matsushita K, Nomura F, Takiguchi M, Hiwasa T
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Journal Title
J Cancer Sci Ther
Volume: 7(2)
Pages: 60-66
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Association of serum antibody levels against TUBB2C with diabetes and cerebral infarction.2015
Author(s)
Hiwasa T, Zhang XM, Kimura R, Machida T, Kitamura K, Yamazoe R, Kunimatsu M, Mine S, Kobayashi E, Iwadate Y, Saeki N, Takemoto M, Kobayashi K, Kawamura H, Ishibashi R, Sakurai K, Fujimoto M, Yokote K, Iwata Y, Nakayama T, Harada J, Kobayashi Y, Ohno M, Chen PM, Nishi E, Yokota M, Kamitsukasa I, et al.
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Journal Title
Gratis J Biomed Sci
Volume: 1(2)
Pages: 49-63
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Elevated levels of autoantibodies against ATP2B4 and BMP-1 in sera of patients with atherosclerosis-related diseases.2015
Author(s)
Hiwasa T, Machida T, Zhang XM, Kimura R, Wang H, Iwase K, Ashino H, Taira A, Arita E, Mine S, Ohno M, Chen PM, Nishi E, Kitamura K, Yamazoe R, Takizawa H, Kashiwado K, Kamitsukasa I, Wada T, Aotsuka A, Kobayashi E, Matsutani T, Iwadate Y, Saeki N, Mori M, Uzawa A, Muto M, Sugimoto K, Kuwabara S, Iwata Y, et al.
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Journal Title
Immunome Res
Volume: 11
Pages: 097
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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