2016 Fiscal Year Annual Research Report
Developing human lipid profiling methods using mass spectrometry and their applications in clinical laboratory tests
Project/Area Number |
26460647
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Research Institution | Shinshu University |
Principal Investigator |
日高 宏哉 信州大学, 学術研究院保健学系, 准教授 (10362138)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
本郷 実 信州大学, 学術研究院保健学系, 教授 (40209317) [Withdrawn]
本田 孝行 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (80238815)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | 脂質分子 / 脂質分子種 / ヒト血液 |
Outline of Annual Research Achievements |
ヒト血漿、血清、気管支肺胞洗浄液などの生体試料を用いて、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析装置(MALDI-TOF- TOF MS,MS/MS), 液体クロマトグラフィー質量分析装置(LC MS/MS), ガスクロマトグラフィー質量分析装置(GC/MS)により、脂質分子及び分子種(異なる脂肪酸側鎖から構成される分子)のプロファイルの作成を行った。今回の研究では、微量成分や未精製では分析困難な試料について、有機溶媒抽出法の改良、ターゲット脂質を部分精製するための薄層クロマトグラフィー(TLC)による抽出法とシリカゲル及びイオン交換ゲルなどを用いたミニカラムクロマトグラフィー(固相抽出カラム)抽出法を検討し、簡易的な試料の調製法を構築することができ、臨床検査に応用できる可能性を示した。最終年度は、ホスファチジルエタノールアミン(PE),リゾPE(プラズマローゲン型とアシル型)、リゾホスファチジン酸、スルファチド,スフィンゴミエリン,モノアシルグリセロール、遊離脂肪酸などの分子種プロファイルを作成できた。これらの結果から、生体脂質の主要構成成分およびリゾ体や代謝産物の微量脂質のプロファイルを視覚化するために、様々なグラフを作成し、プロファイルの判読の効果を検討した。これまでは,健常者データについて作成したが、現在、臨床との共同研究により疾患別のプロファイルおよびグラフ化により、疾患特異的的な脂質プロファイルの簡易な解析法を検討している。また、プロファイルデータは,LC MS専用の解析ソフトにより分析した脂質分子種の解析を行い、脂質分子間の関連性を検討した。今回使用した解析ソフトは、LC MS専用研究ソフトであるので、これらの収集した結果を基に、簡易な一般ソフトへの応用を検討している。
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[Journal Article] Study Project on Prevention of Metabolic Syndrome among Children, Adolescents, and Young Adults in Shinshu. Importance of cystatin C and uric acid levels in the association of cardiometabolic risk factors in Japanese junior high school students.2016
Author(s)
Harada Mikiko, Izawa Atsushi, Hidaka Hiroya, Nakanishi Keisuke, Terasawa Fumiko, Motoki Hirohiko, Yazaki Yoshikazu, Ikeda Uichi, Hongo Minoru
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Journal Title
J Cardiol
Volume: 69
Pages: 222-227
DOI
Peer Reviewed
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