2014 Fiscal Year Research-status Report
B型肝炎ウイルスcccDNAを標的とするDNA編集酵素の役割
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26460993
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Research Institution | Kanazawa University |
Principal Investigator |
喜多村 晃一 金沢大学, 医学系, 助教 (70378892)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | B型肝炎ウイルス |
Outline of Annual Research Achievements |
B型肝炎ウイルス(HBV)持続感染者は国内で130~150万人と推定されており、感染を放置すれば慢性肝炎、肝硬変、肝がんへと進行するおそれがある。HBV持続感染では、cccDNAと呼ばれる環状ウイルスDNAが、宿主細胞の核内に維持されウイルス複製の鋳型となる。cccDNAを除去する有効な治療法は無く、B型肝炎の根治が難しい理由となっているが、これまで解析系が十分でなかったために、cccDNAを標的とする分子機構の知見が少ない。本研究では、HBV cccDNAに作用し遺伝情報を改変すると考えられる宿主因子AID/APOBEC蛋白質の分子機構とその役割について解析を行い、B型肝炎克服への手がかりを得ることを目指している。本年度はHBV安定発現細胞株及びHBV感染許容細胞株を用いたin vitro実験により解析を行った。cccDNAが比較的多く産生されるHBV安定細胞株ではインターフェロンγによって発現誘導されるAPOBEC3GがcccDNAへ変異を導入していることをノックダウン実験で確認した。さらに塩基除去修復因子UNGの活性を阻害するとcccDNAの変異頻度が増加したことから、APOBEC3Gが導入したC-to-U変異をUNGが除去していると考えられる。また培養細胞感染実験においてはcccDNAの変異率が上昇する条件でウイルス産生量が減少することを明らかにした。以上のようにHBV cccDNAへのAPOBEC蛋白質と修復因子の作用を示す結果が得られた。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初計画通り、HBV安定発現細胞株及びHBV感染許容細胞株を用いたcccDNAの解析を進め、APOBEC蛋白質及び修復因子の作用を確認しており、概ね順調に進展したと考えている。
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Strategy for Future Research Activity |
研究計画の通り、ノックアウトマウスによる解析を進めるとともに、新たに樹立されたtet-offプロモーター制御下のHBV発現細胞を用いた解析を開始する。この細胞株の使用で、よりcccDNA由来ウイルス複製能の解析が推進できると考えている。
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Causes of Carryover |
未使用額39,751円が生じたが、次年度に使用する事が効率的と考えたため平成27年度に持ち越しをした。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
未使用額39,751円は消耗品購入等にあてる。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] TGF-β Suppression of HBV RNA through AID-Dependent Recruitment of an RNA Exosome Complex2015
Author(s)
Liang G, Liu G, Kitamura K, Wang Z, Chowdhury S, Ahasan MM, Wakae K, Koura M, Shimadu M, Kinoshita K, Muramatsu M.
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Journal Title
PLOS Pathog
Volume: 11
Pages: e1004780
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] APOBEC3A and 3C decrease human papillomavirus 16 pseudovirion infectivity2015
Author(s)
Ahasan MM, Wakae K, Wang Z, Kitamura K, Liu G, Koura M, Imayasu M, Sakamoto N, Hanaoka K, Nakamura M, Kyo S, Kondo S, Fujiwara H, Yoshizaki T, Mori S, Kukimoto I, Muramatsu M.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun
Volume: 457
Pages: 295-299
DOI
Peer Reviewed
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