FoxM1トランスジェニックマウスを用いた肝発癌の病態解明と新規治療法の開発

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26461001
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 吉田 雄一 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30457014)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 木曽 真一 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任准教授 (40335352)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: FoxM1 / 肝細胞癌 / トランスジェニックマウス / 脂肪肝

Outline of Annual Research Achievements

背景及び目的：Forkhead Box M1（FoxM1）転写因子は、種々の癌組織で過剰発現しており、ヒト肝細胞癌手術組織を用いた検討により、腫瘍部では非腫瘍部に比してFoxM1の発現が約10倍と著明に亢進しており、腫瘍部におけるFoxM1発現が術後の生存率及び再発を規定する独立因子であることを明らかにしている（論文投稿中）。そこで、今回、FoxM1を肝臓特異的に発現誘導させることが可能なトランスジェニックマウスを作成し、FoxM1分子が発現することが肝発癌に関与するのかを明らかにすることを目的とした。方法：テトラサイクリン誘導体であるドキシサイクリン(DOX)投与により発現が誘導されるTet-Onシステムと臓器特異的Cre-LoxPシステムを組み合わせることにより、任意の時期に任意の組織でFoxM1の発現誘導が可能なトランスジェニックマウス（FoxM1 inducible Hepatocyte-specific transgenic mouse：FoxM1iHepTg ）を作成した。結果：１）FoxM1iHepTgマウスにおいて飲水中DOXにより、FoxM1蛋白の発現誘導をウエスタンブロットにて確認した。２）FoxM1iHepTgに対して、飲水中DOXに加え、高脂肪食食餌負荷を行ったところ、負荷4週時点において、対照マウスに比し、脂肪蓄積の亢進を認めた。考察及び結論：肝細胞特異的、時期特異的にFoxM1を過剰発現可能なマウスの作製に成功した。FoxM1過剰発現は、肝脂肪蓄積に促進的に作用する可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

今回、肝細胞特異的、時期特異的にFoxM1を過剰発現可能なマウスの作製に成功し、計画通り、脂肪肝モデルにおいて、その影響について検討を加えることができた。この結果、予想外に、FoxM1が肝脂肪蓄積に対して促進的に作用することを見出した。実験系の確立とともに、その表現型の結果も得ている点、実験計画は順調に遂行できていると考える。

Strategy for Future Research Activity

今回、確立したマウス実験系を用いて、今後、１）FoxM1が肝脂肪蓄積に与える影響とその分子機構　２）脂肪性肝炎を背景とした肝発癌　に対する影響を詳細に検討する。さらに、マウス及びヒト肝癌細胞株を用いて、その詳細な分子機構を解析することを計画している。

Research Products

• [Journal Article] N-acetylglucosaminyltransferase V exacerbates concanavalin A-induced hepatitis in mice. (2015)
  • Author(s): Kamada Y, Sato M, Kida S, Akita M, Mizutani K, Fujii H, Sobajima T, Yoshida Y, Shinzaki S, Takamatsu S, Takehara T, Miyoshi E
  • Journal Title: Mol Med Rep. Volume: 11 Pages: 3573, 3584
  • DOI: 10.3892/mmr.2015.3168.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Loss of Gab1 adaptor protein in hepatocytes aggravates experimental liver fibrosis in mice (2015)
  • Author(s): Kizu T, Yoshida Y, Furuta K, Ogura S, Egawa M, Chatani N, Hamano M, TakemuraT, Ezaki H, Kamada Y, Nishida K, Nakaoka Y, Kiso S, Takehara T
  • Journal Title: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. Volume: 308 Pages: 613, 624
  • DOI: 10.1152/ajpgi.00289.2014.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The real impact of telaprevir dosage on the antiviral and side effects of telaprevir, pegylated interferon and ribavirin therapy for chronic hepatitis C patients with HCV genotype 1. (2015)
  • Author(s): Oze T, Hiramatsu N, Yoshida Y et al.
  • Journal Title: J Viral Hepat. Volume: 22 Pages: 254, 262
  • DOI: 10.1111/jvh.12289.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The prospective randomized study on telaprevir at 1500 or 2250 mg with pegylated interferon plus ribavirin in Japanese patients with HCV genotype 1. (2015)
  • Author(s): Oze T, Hiramatsu N, Yoshida Y et al.
  • Journal Title: J Gastroenterol. Volume: 50 Pages: 313, 322
  • DOI: 10.1007/s00535-014-0965-8.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Significance of liver stiffness measurement by acoustic radiation force impulse (ARFI) among hepatitis C patients. (2014)
  • Author(s): Yamada R, Hiramatsu N, Yoshida Y et al.
  • Journal Title: J Med Virol. Volume: 86 Pages: 241, 247
  • DOI: 10.1002/jmv.23840.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Post-treatment levels of α-fetoprotein predict incidence of hepatocellular carcinoma after nterferon therapy. (2014)
  • Author(s): Oze T, Hiramatsu N, Yoshida Y et al.
  • Journal Title: Clin Gastroenterol Hepatol. Volume: 12 Pages: 1186, 1195
  • DOI: 10.1016/j.cgh.2013.11.033.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Liver stiffness measurement by acoustic radiation force impulse is useful in predicting the presence of esophageal varices or high-risk esophageal varices among patients with HCV-related cirrhosis. (2014)
  • Author(s): Morishita N, Hiramatsu N, Yoshida Y et al.
  • Journal Title: J Gastroenterol. Volume: 49 Pages: 1175, 1182
  • DOI: 10.1007/s00535-013-0877-z.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Loss of Grb2-associated binder 1 results in enhanced hepatocyte necrosis and high mortality in mice with acute liver failure (2014)
  • Author(s): Kunimaro Furuta, Yuichi Yoshida, Takashi Kizu, Satoshi Ogura, Mayumi Egawa, Norihiro Chatani, Yoshihiro Kamada, Shinichi Kiso, Tetsuo Takehara
  • Organizer: 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • Place of Presentation: John B. Hynes Veterans Memorial Convention Center, Boston, MA, USA
  • Year and Date: 2014-11-09
• [Presentation] Grb2-associated binder 1 protects against liver fibrosis via suppression of CCL5 production from hepatocytes (2014)
  • Author(s): Yuichi Yoshida, Takashi Kizu, Kunimaro Furuta, Satoshi Ogura, Mayumi Egawa, Norihiro Chatani, Yoshihiro Kamada, Shinichi Kiso, Tetsuo Takehara
  • Organizer: 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • Place of Presentation: John B. Hynes Veterans Memorial Convention Center, Boston, MA, USA
  • Year and Date: 2014-11-09
• [Presentation] 急性肝不全におけるアダプター蛋白質Gab1を介した恒常性維持と治療標的としての可能性について (2014)
  • Author(s): 古田訓丸、吉田雄一、竹原徹郎
  • Organizer: 第18回日本肝臓学会大会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（神戸）
  • Year and Date: 2014-10-23
• [Presentation] 肝細胞壊死を起点とした再生／恒常性維持の“鍵分子”としてのGab１の意義 (2014)
  • Author(s): 吉田雄一, 古田訓丸, 竹原徹郎
  • Organizer: 第50回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ（東京）
  • Year and Date: 2014-05-29
• [Presentation] 肝線維化に対する新規治療標的としての肝細胞Gab１‐CCL５経路の意義 (2014)
  • Author(s): 吉田雄一, 木津崇, 古田訓丸, 小倉智志, 柄川真弓, 茶谷徳啓, 江崎久男, 鎌田佳宏, 木曽真一, 竹原徹郎
  • Organizer: 第50回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ（東京）
  • Year and Date: 2014-05-29