Therapeutic study of rheumatoid arthritis by humanized anti-PAD4 antibody

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26461470
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 金澤 智 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (90347401)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 関節リウマチ / 間質性肺炎 / 炎症 / PAD4 / 抗CCP抗体 / トランスレーショナルリサーチ / モデル動物

Outline of Annual Research Achievements

【目的】関節リウマチの治療法は、大きな進歩を遂げている一方、さらなる早期治療法を確立することは重要な課題の一つである。そこで関節炎早期のバイオマーカー、抗CCP抗体に着目し、シトルリン化タンパク質産生の原因と考えられるPAD4が関節リウマチ進行に対しどの様に関与するか、シトルリン化酵素活性阻害型の抗PAD4抗体を作成し検討した。
【方法】PAD4の構造解析データを基に、酵素活性領域を同定し、この領域をターゲットとするモノクローナル抗体作成をおこなった。ニワトリにおけるPAD4相同遺伝子は同定されていない。そこでニワトリを利用したファージディスプレイによりクローン選択し、親和性およびシトルリン化酵素阻害活性の高いPAD4酵素活性阻害型抗PAD4抗体作成を試みた。またニワトリ抗PAD4抗体を関節リウマチモデルマウス（D1CCマウス：オリエンタル酵母工業（株）より販売）に投与し、その関節炎治療効果を検討した。
【結果】ニワトリ由来抗体は、これまでの研究で得られたマウス抗体と比較するとターゲット領域のややN末側を認識し、抗体親和性は、約10倍上昇した。さらに抗PAD4抗体投与による関節炎治療効果も確認できた。
【結論】ニワトリ抗PAD4モノクローナル抗体は、マウス抗PAD4抗体より親和性、シトルリン化酵素活性阻害が、ともに高かった。またD1CCマウスにおける関節炎を効果的に抑制した。PAD4は関節炎早期における治療標的となりうる。

Research Products

• [Journal Article] A diagnostic marker for superficial urothelial bladder carcinoma: lack of nuclear ATBF1 (ZFHX3) by immunohistochemistry suggest malignant progression (2016)
  • Author(s): Kawaguchi M., Hara N., Vladimir B., Koike H., Suzuki M., K. Tae-Sun K., Nan G., Yu D., Sheng Z., Fujinawa Y., Yamamoto O., Ito H., Tomita Y., NaruseY., Sakamaki A., Ishii Y., Tsuneyama K., Inoue M., Itoh J., Yasuda M., Sakata N., Cha-Gyun J., Kanazawa S., Akatsu H., Minato H., Nojima T., Asai K., Miura Y.
  • Journal Title: BMC Cancer Volume: 16 Pages: 805-815
  • DOI: 10.1186/s12885-016-2845-5
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] A novel quinone derived from 5-hydroxyindoleacetic acid reacts with protein: Possible participation of oxidation of serotonin and its metabolite in the development of atherosclerosis (2016)
  • Author(s): Kato, Y., Oki, K., Suga, N., Ono, S., Ishisaka, A., Miura, Y., Kanazawa, S., Naito, M., Kitamoto, N., Kettle, A. J.
  • Journal Title: Free Radic Biol Med Volume: 101 Pages: 500-510
  • DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2016.11.023
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Chronic interstitial pneumonitis in D1CC/ D1BC mouse, animal model of rheumatoid arthritis (2017)
  • Author(s): Satoshi Kanazawa and Yoko Miura
  • Organizer: 19th Takeda Science Foundataion Symposium on Bioscience (Osaka)
  • Place of Presentation: 大阪府・吹田市 武田薬品研修所
  • Year and Date: 2017-01-20 – 2017-01-21
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Ectopic expression of B7.1 (CD80) in chondrocytes leads to chronic inflammatory arthritis in mice (2017)
  • Author(s): Yoko Miura and Satoshi Kanazawa
  • Organizer: 19th Takeda Science Foundataion Symposium on Bioscience (Osaka)
  • Place of Presentation: 大阪府・吹田市 武田薬品研修所
  • Year and Date: 2017-01-20 – 2017-01-21
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 間質性肺炎モデルマウスから単離した繊維芽細胞の解析 (2016)
  • Author(s): 金澤 智
  • Organizer: 第19回間質性肺炎細胞分子病態研究会
  • Place of Presentation: 東京都・千代田区 砂防会館
  • Year and Date: 2016-08-20 – 2016-08-20
• [Presentation] 関節リウマチモデル（D1CC, D1BCマウス）における関節炎発症重篤化のメカニズムについて (2016)
  • Author(s): 金澤 智
  • Organizer: 日本炎症・再生医学会
  • Place of Presentation: 京都府・京都市 京都市勧業館 みやこめっせ
  • Year and Date: 2016-06-16 – 2016-06-17
• [Presentation] 関節リウマチマウスモデル(D1CCxD1BCマウス)における間質性肺炎誘導 (2016)
  • Author(s): 金澤 智
  • Organizer: 第60回日本リウマチ学会総会
  • Place of Presentation: 神奈川県・横浜市 パシフィコ横浜
  • Year and Date: 2016-04-21 – 2016-04-23
• [Remarks] 名古屋市立大学大学院医学研究科細胞分子生物学
  • URL: http://www.med.nagoya-cu.ac.jp/molgene.dir/