気管支喘息に対する分子病態に基づいた新規ペプチド療法の開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26461565
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 安戸 裕貴 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (70422285)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 磯島 豪 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (00568230) ; 三牧 正和 帝京大学, 医学部, 教授 (40392419) ; 加藤 元博 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 小児がんセンター 移植・細胞治療科, 医長 (40708690)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: ペプチド療法 / エンドタイプ / 気管支喘息

Outline of Annual Research Achievements

計画している具体的な研究内容は、1.複合体形成に関わるPLC-β3領域内結合部位ペプチド配列のマッピングおよびその機能的評価2.TAT-結合部位ペプチドの作成と精製3.アレルギーマウスモデルおよび患者におけるTAT-結合部位ペプチドの治療効果の解析、判定である。
1.複合体形成に関わるPLC-β3領域内結合部位ペプチド配列のマッピングおよびその機能的評価：現在GSTプルダウンアッセイ法により、PLC-β3 C末端領域内におけるSPSL複合体形成に必要と思われるLynとの結合部位の同定を行った。

2.TAT-結合部位ペプチドの作成と精製：1.により同定されたLynとの結合部位をTAT発現ベクターに組み込み、TAT-結合部位ペプチドの精製を行った。

3.アレルギーマウスモデルおよび患者におけるTAT-結合部位ペプチドの治療効果の解析および判定：現在気管支喘息患者の対象者の登録作業を行っている。今後、これらの患者より末梢血を採取し、2.で作成したTAT-結合部位ペプチドを投与して細胞増殖、ヒスタミンの遊離、Th２サイトカインの産生への影響を評価する予定である。また、オボアルブミンを抗原とする喘息発症モデルマウスに対しても、同様の評価を行っている。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

1.複合体形成に関わるPLC-β3 C末領域内結合部位ペプチド配列のマッピングおよびその機能的評価:プルダウンアッセイに必要なコンストラクトの作成、精製が困難でありだったため、発現ベクターの変更、精製時のカラムの変更などの条件設定に時間がかかってしまった。また、当初想定したよりも多くのPLC-β3 C末領域内結合部位のコンストラクトを作成して評価する必要が生じたことにより、想定した予定より時間がかかってしまった事が考えられる。

Strategy for Future Research Activity

今後引き続き、2.TAT-結合部位ペプチドの作成と精製　3.アレルギーマウスモデルおよび患者におけるTAT-結合部位ペプチドの治療効果の解析および判定について推進していく予定である。現在計画の時間の遅れに対して、既に、研究補助員、研究協力施設の確保による人手の補充をし、予定推進を図っている。

Causes of Carryover

本年度は、研究補助員を募集しなかったため、人件費を使用する必要がなかった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

本年度の物品の未使用金額については、翌年度以降の研究物品費用を充当する予定である。人件費については、翌年度研究補助員を雇用するにあたり、本年度の人件費を翌年度に繰り越して使用する予定である。