2014 Fiscal Year Research-status Report
Exosomal CEACAM1をターゲットとした大腸癌新規腫瘍マーカーの開発
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26461958
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
横山 省三 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90398462)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀田 司 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50244744)
瀧藤 克也 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (00254540)
松田 健司 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (30398458)
山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | CEACAM1 / exosome / 大腸癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
①大腸患者血中のCEACAM1, CEACAM5およびCEACAM6の臨床学的意義
exosome上のCEA familyを検索する前に、血清中におけるCEACAM1および同じCEA familyに属する大腸癌の腫瘍マーカーであるCEA(CEACAM5)と好中球に発現するCEACAM6との関連について評価する必要がある。この比較により、CEACAM1の変化が血球系細胞の依存しないかどうかを評価する。大腸癌患者27例の血清についてCEACAM1, CEACAM5およびCEACAM6をELISAを用いて測定し、さらに臨床病理学的因子について検討し、CEACAM6が遠隔転移と関連する可能性が示唆された。
②大腸患者血中exosome上のCEACAM1測定と臨床学的意義
これまでにわれわれは、腫瘍におけるCEACAM1細胞内ドメインisoform balanceについて、大腸癌の臨床検体の浸潤先進部においてCEACAM1-LがCEACAM1-Sに対し優位な症例では、有意にリンパ節および血行性転移、予後と相関すること、また大腸癌培養細胞HT29にCEACAM1-4Lを強制発現させることで癌細胞の浸潤能は増強し、大腸癌培養細胞HT29およびLS174TにCEACAM1-4Sを強制発現すると浸潤能を抑制することを報告してきた。さらに、大腸癌発育先進部間質内に、3次元培養やマウスモデルで観察される中空を伴う球体が存在することを確認し、buddingよりも転移や予後との関連を認めることを報告してきた。肝転移巣ではCEACAM1-4Lがより強発現し、さらにCEACAM1-4Sも強発現することによりCD44の発現が促進され、足場非依存性増殖能を得ることを確認した。本研究では、上記の現象を、血液検査で評価するために、exosomeのCEACAM1細胞内ドメインisoform balanceを評価することで、癌の浸潤・転移のstatusを評価可能となる。まず、isoformの区別のないecxosome上のCEACAM1について検討した。大腸癌患者32例の血液exosome抽出キットを用いてexsosomeを抽出し、CEACAM1についてELISAを用いて測定した、現在、臨床病理学的因子との関連について解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
大腸癌患者血清中のexosome上のCEACAM1 isoform balanceの同定の前段階として、血清中のCEACAM familyの状態について把握しておく必要があり、その研究を行っているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
大腸癌患者血清中のexosome上のCEACAM1 isoform balanceの同定の前段階として、血清中のCEACAM familyの状態について把握できた後、血清中のexosome上のCEACAM1の測定、およびisoform balanceについて検討する予定である。また、CEACAM1遺伝子導入培養細胞株を使った、exosomeの量およびCEA familyの発現変化にについて、基礎的に検討する予定である。①CEACAM1遺伝子導入細胞由来培養液中exosome上のCEACAM1細胞内ドメインバランスの変化. 大腸癌培養細胞株HT29およびHCT116にCEACAM1-4Lまたは-4Sを強制発現させた細胞の培養上清に分泌されたexosomeを分離し、exsosome中のCEACAM1細胞内ドメインisoform balanceの変化が細胞での発現と相関することを明らかにする。②血中exosome上のCEACAM1細胞内ドメインisoform balanceの同定と臨床学的意義. CEACAM1が進行大腸癌において浸潤先進部で再発現し、浸潤した癌細胞は大腸癌発育先進部間質において中空を伴う球体を形成し、肝転移巣でCEACAM1の発現がさらに増強し、CEACAM1が大腸癌の転移や予後に相関することがすでに明らかであり、今回は血中のexosomeにおけるCEACAM1の発現と細胞内ドメインisoform balanceが臨床病理学的因子と相関し、大腸癌の早期診断および再発診断に応用可能であることを明らかにする。③CEACAM1関連マイクロRNAの解析とexosome内の新規腫瘍マーカーの開発. これまでに、CEACAM1-4Lおよび-4Sを強制発現させた大腸癌培養腫瘍株HCT116に対し、messenger RNA (mRNA)およびmicroRNA(miRNA)について 網羅的に検討し、CEACAM1 ｍRNAの発現により変化を受ける、miRNAを同定した。このmiRNAの発現により誘導される上皮間葉転換および間葉上皮転換および幹細胞性における役割を明らかにし、血中exosome内のmiRNA発現が大腸癌の診断に応用可能であることを確認する。
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[Journal Article] CEACAM1 and hollow spheroid formation modulate the chemosensitivity of colorectal cancer to 5-fluorouracil.2015
Author(s)
Yamamoto N, Yokoyama S, Ieda J, Mitani Y, Yamaguchi S, Takifuji K, Hotta T, Matsuda K, Watanabe T, Shively JE, Yamaue H.
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Journal Title
Cancer Chemotherapy and Pharmacology
Volume: 75
Pages: 421-430
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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