2014 Fiscal Year Research-status Report
p62-Keap1-Nrf2 pathwayによる大腸癌抗癌剤耐性機序の解明
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26462006
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
亀山 仁史 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (40626420)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
若井 俊文 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50372470)
味岡 洋一 新潟大学, 医歯学系, 教授 (80222610)
西條 康夫 新潟大学, 医歯学系, 教授 (10270828)
松田 康伸 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (40334669)
小山 諭 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (10323966)
廣瀬 雄己 新潟大学, 医歯学総合病院, 医員 (10737365)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | NQO1 / Nrf2 / Keap1 / KRAS / p62 / 抗癌剤耐性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者らは、KRAS遺伝子変異のないKRAS野生型大腸癌であっても、薬物療法が奏効しない症例が存在することに着目し「メインストリームであるOncogenic Ras-MEK-ERK pathwayとは別経路が大腸癌の抗癌剤耐性機序に関与している」と考えた。そこで、p62-Keap1-Nrf2 pathwayが大腸癌の抗癌剤耐性に関与しているという仮説を立て、これを証明することを研究目的とした。
平成26年度の研究実施計画として、（1）切除標本におけるp62/Nrf2/NQO1発現についてモノクローナル抗体を用いた免疫染色を行った。本研究51例の対象症例中、78.4%の症例でNQO1が発現し、21.6%はNQO1陰性であることが明らかとなった。Nrf2は細胞質、核内の染色分布に差異を認めており、評価方法を検討中である。p62については、リン酸化p62の染色を行い、個別化の評価を行っている。いずれの結果も大腸癌抗癌剤耐性機序における新知見であると考えている。（2）KRAS遺伝子変異については対象症例で検索済みであり、化学療法施行例においてはRECIST v1.1に準拠した効果判定を行った。予後については全例で最新情報を常にアップデートしている。KRAS statusとNQO1発現を組み合わせた予後解析を行ったところ、統計学的な有意差を認めた（P = 0.049）。特にKRAS野生型かつNQO1発現陰性症例では、予後が良い可能性が示唆された。その理由として抗癌剤の奏効が関与している可能性を考えており、免疫組織化学染色の結果と実臨床の関連が明らかになると考えている。（3）p62タンパク発現、Keap1 mutationについての分子生化学的検索を平成27年度以降に行っていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
NQO1の発現解析は予定通りすでに終了している。一方で、p62、Nrf2の免疫組織学染色については、当初入手した抗体による染色では個別化が困難であった。染色濃度による分類や、別抗体による染色などを検討している。NQO1と臨床データとの関連については概ね順調に進捗しており、途中経過報告として研究会での発表や和文論文化を行った。進行再発大腸癌におけるNQO1発現と予後の関連についての新知見が得られている。現在、英文論文化に向けて準備中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
NQO1発現と臨床データの関連について解析が進み、World Congressof Surgery（Aug. 2015, Bangkok）での発表を予定している。研究費は免疫組織化学染色に用いる抗体、学会発表にかかる旅費、英文論文に関わる費用などに使用する予定としている。現在、英文論文化に向けて準備中である。p62免疫組織化学染色による個別化が困難であったため、リン酸化p62の染色を検討している。p62タンパク発現、Keap1の遺伝子変異など、分子生化学的検討を進めるため、生化学的研究実績のある分担者を含め、3名の分担者を追加して研究を促進していく予定である。
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| Causes of Carryover |
当初の予定よりもp62，Nrf2，Keap1免疫組織化学染色が遅れているため、予算が繰越となった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
リン酸化p62抗体など免疫染色用抗体の購入、英文校正費、学会旅費などに使用する予定。NQO1発現と予後との関連が明らかになってきており、本年度はその結果を元に発表、論文化の予定をたてている。追加実験が必要な場合も想定され、その予算としても使用予定である。
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