2017 Fiscal Year Annual Research Report
CD133 dependent signals and microRNAs in cancer stem cells
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26462069
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
松原 修一郎 鹿児島大学, 医用ミニブタ・先端医療開発研究センター, 准教授 (60199841)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高尾 尊身 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (80171411)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 癌幹細胞 / 膵臓癌 / CD133 / microRNA / Slug / HIF-1alpha / EMT / mTOR複合体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞表面マーカーCD133は幹細胞の分離同定にひろく利用されているが、その分子機能と幹細胞様形質との関連については十分に解明されていない。我々は膵癌の細胞株(Capan-1)において、CD133の発現が幹細胞様形質と相関し、また、臨床サンプルにおいてCD133の染色性が予後と相関することに着目して、CD133高発現の亜株(Capan-1M9)を樹立した。本研究はこの高発現細胞の性質をCD133ノックダウン細胞と比較することにより、CD133の分子機能を明らかにし、同時にCD133反応性miRNAの関与を検討しようとするものである。
CD133高発現細胞は上皮間葉転換(EMT)が誘導されていると考えられたが、CD133ノックダウンにより、運動能が低下するとともに間葉系マーカーの発現が抑制され、CD133のEMT誘導への関与が確認された。両者で発現の変化するmRNAおよびmiRNAを網羅的に解析し、まず転写因子Slugの関与が明らかになった。EMT誘導因子SlugのタンパクレベルはCD133の発現によって増加し、そのノックダウンによってCapan-1M9細胞の間葉的形質が抑制された。次に、miRNAのmiR30ファミリーの関与が示され、miR30レベルはCD133発現によって増加し、強制発現によって間葉的形質を促進する。さらに、低酸素状態では低酸素反応の鍵レギュレーターHIF-1 alphaのタンパクレベルがCD133発現によって増加し、EMTに関与することが示唆された。
最終年度(H29年度)はCD133下流で幹細胞様形質の維持に働く可能性が高いmTORの複合体1および2の機能について調べ、両者は異なったメカニズムで幹細胞性に関与していることを示す結果を得た。
以上、CD133はmiRNAを含む複数の経路で膵癌細胞のEMTを誘導することが明らかになり、新たな治療標的候補が示された。
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