Proteomic analysis of stromal tissue of pancreas

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26462070
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 遠藤 格 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (60211091)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 廣島 幸彦 横浜市立大学, 医学研究科, 客員研究員 (60718021) ; 森 隆太郎 横浜市立大学, 医学部, 講師 (90596412)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 膵癌 / 浸潤 / 転移 / 免疫 / 膵炎 / Kras / CRMP4

Outline of Annual Research Achievements

【CRMP4の高発現、低発現の膵癌細胞株を用いたCRMP4リン酸化の意義の検証】
（１）CRMP4安定発現株の樹立：CRMP4-EGFPをCRMP4低発現株であるPanc1に導入し、安定発現株を樹立し、浸潤能、転移能を比較検討する。本年度までに申請者らはPanc1-CRMP4-EGFPの安定発現株の樹立に成功した。また、コントロールとして、Panc1-EGFPの安定発現株を樹立し、浸潤能を比較検討した結果、Panc1-CRMP4-EGFPにおいて、有意にフィロポディア（糸状仮足；細胞の浸潤に不可欠）形成と浸潤能の増加を認めた（未発表データ）。今後は本細胞株を用い、CRMP4リン酸化酵素、阻害薬の効果の検証を行っていく予定である。
【CRMP4ノックアウトマウスを用いた膵癌自然発癌モデルの作成】
KrasG12Dマウスを入手し、CRMP4ノックアウトマウスとの交配、飼育を行っており、少数匹であるがCRMP4ノックアウトマウス（KrasG12D/Pdx-Cre/Crmp4-/-）の獲得に成功した。また、慢性膵炎は膵癌発症リスクを13倍以上になることが報告されており、膵癌発癌の強いリスク因子と考えられ、我々はマウスの急性膵炎モデル、慢性膵炎モデルにおいて主に間質に浸潤したT細胞と一部腺房細胞の細胞質にCRMP4が発現しており、かつリン酸化されていることを解明した（Sato S, et al, J Hepatobiliary Pancreat Sci, 2016）。T細胞にCRMP4が発現していることからCRMP4は免疫系にも関わっていることが示唆された。さらにKrasG12D/Pdx-Creマウスの急性膵炎モデルで前癌病変を確認した。現在KrasG12D/Pdx-Cre/Crmp4-/-の急性膵炎モデルの前癌病変と比較し、異形成の程度、病変の進展範囲の比較解析を行っている。

Research Products

• [Journal Article] Caerulein-induced pancreatitis augments the expression and phosphorylation of collapsin response mediator protein 4. (2016)
  • Author(s): Sato S, Nakamura F, Hiroshima Y, Nagashima Y, Kato I, Yamashita N, Goshima Y, Endo I.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci. Volume: 23 Pages: 422-431
  • DOI: 10.1002/jhbp.361
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Patient-derived mouse models of cancer need to be orthotopic in order to evaluate targeted anti-metastatic therapy. (2016)
  • Author(s): Hiroshima Y, Maawy A, Zhang Y, Zhang N, Murakami T, Chishima T, Tanaka K, Ichikawa Y, Bouvet M, Endo I, Hoffman RM.
  • Journal Title: Oncotarget. Volume: 7 Pages: 71696-71702
  • DOI: 10.18632/oncotarget.12322
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Effective fluorescence-guided surgery of liver metastasis using a fluorescent anti-CEA antibody. (2016)
  • Author(s): Hiroshima Y, Lwin TM, Murakami T, Mawy AA, Kuniya T, Chishima T, Endo I, Clary BM, Hoffman RM, Bouvet M.
  • Journal Title: J Surg Oncol. Volume: 114 Pages: 951-958
  • DOI: 10.1002/jso.24462
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Effective molecular targeting of CDK4/6 and IGF-1R in a rare FUS-ERG fusion CDKN2A-deletion doxorubicin-resistant Ewing's sarcoma patient-derived orthotopic xenograft (PDOX) nude-mouse model. (2016)
  • Author(s): Murakami T, Singh AS, Kiyuna T, Dry SM, Li Y, James AW, Igarashi K, Kawaguchi K, DeLong JC, Zhang Y, Hiroshima Y, Russell T, Eckardt MA, Yanagawa J, Federman N, Matsuyama R, Chishima T, Tanaka K, Bouvet M, Endo I, Eilber FC, Hoffman RM.
  • Journal Title: Oncotarget. Volume: 7 Pages: 47556-47564
  • DOI: 10.18632/oncotarget.9879
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Modified Liver Hanging Maneuver for En-bloc Right-sided Hepatectomy Combined with Total Caudate Lobectomy for Colon-Cancer Liver Metastasis and Hepatocellular Carcinoma. (2016)
  • Author(s): Hiroshima Y, Matsuo K, Kawaguchi D, Kikuchi Y, Endo I, Koda K, Togo S, Hoffman RM, Tanaka K.
  • Journal Title: Anticancer Res. Volume: 36 Pages: 1729-1735
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] The relationship between pancreatic cancer and phosphorylation mechanism of CRMP4 (2016)
  • Author(s): Keiichi Y, Nakamura F, Sato S, Hiroshima Y, Goshima Y, Endo I
  • Organizer: IAP/JPS/AOPA joint meeting 2016
  • Place of Presentation: Sendai International Center (Miyagi)
  • Year and Date: 2016-08-04 – 2016-08-07
  • Int'l Joint Research