2014 Fiscal Year Research-status Report
高血糖による血液脳関門障害におけるペリサイトの役割
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26462166
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
林 健太郎 長崎大学, 病院(医学系), 講師 (40404222)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
出雲 剛 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (40343347)
諸藤 陽一 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (40437869)
福田 修志 長崎大学, 病院(医学系), 医員 (40646577)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 血液-脳関門 / 高血糖 / ペリサイト / ラット |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ラット脳より内皮細胞，ペリサイト，アストロサイトを分離した．アストロサイト由来のAngⅡがBBBの機能調節に関与することが報告されているため、脳毛細血管内皮細胞とアストロサイトとの共培養系を作製し，カンデサルタンの影響を検討した．
低酸素負荷では内皮細胞の単層培養モデルを用い，6時間の低酸素（oxygen-glucose deprivation, OGD）と24時間の再酸素化（reoxygenation）を負荷した．カンデサルタン（10 nM）は虚血開始時に添加した．虚血再灌流によるBBB機能への影響は経内皮電気抵抗(TEER)およびsodium fluorescein(NaF)の透過性を指標に判定した．またtight junction proteinであるclaudin-5とoccludinの発現を免疫染色および免疫ブロッティングにより検討した.
通常の培養状態では、カンダサルタンを投与するとTEERは単層モデルでは変化なく、共培養モデルでは上昇した．低酸素負荷によりTEERの低下とNaFの透過性亢進を認め，BBB機能の低下が観察されたが，カンデサルタンはこれらを有意に抑制した．claudin-5とoccludinの発現量はカンデサルタンの投与の有無で変化はなかったが，内皮細胞の形態が敷石状に変化し，カンデサルタンはそれを抑制した．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
血液-脳関門のin vitro modelを作製し，カンデサルタンの影響を評価した．今後，高血糖負荷の影響を検討する予定である．
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| Strategy for Future Research Activity |
血液-脳関門のin vitro modelに高血糖負荷を与え，その病態を評価し，制御を試みる予定である．
結果の一部は既に関連学会で発表し，論文投稿に至っている．
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| Causes of Carryover |
実験機器，試薬が見積より安価に購入できたため，次年度使用額が生じた．
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度使用額で試薬を追加購入し，多面的に評価できるように計画する．
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