VPAC2 アゴニスト発現ベクター構築と肺高血圧治療

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26462342
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 水野 祐介 横浜市立大学, 附属病院, 准教授 (80433192)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 渡辺 至 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員教授 (20534142) ; 新堀 博展 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員准教授 (60404993) ; 川上 裕理 横浜市立大学, 附属市民総合医療センター, 助教 (90407958)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 肺高血圧 / ＶＰＡＣ２ / ＭＳＣ

Outline of Annual Research Achievements

神経伝達物質VIPは肺高血圧症(PH)治療薬の一つとされながら、多様な生理活性や半減期から評価は確立していなかった。本研究においえてはまず、肺高血圧ラットを用い、ＶＰＡＣ２アゴニスト及び他のＶＩＰ，ＰＡＣＡＰアナログ等の静脈内投与を行い血圧、右室圧、心拍出量などの循環動態を検討した。その結果、VIP関連受容体の内VPAC2 agonistのみVIPより優れて、PGI2に匹敵して肺動脈圧低下、肺血管抵抗低下、心拍出量増加させることを確認した。
既に発症した肺高血圧に対するVPAC2アゴニストの血行動態へ評価を得たが、長期持続投与による治療効果は不明であった。VPAC2アゴニストの長期投与の肺高血圧抑制効果を検証するため、ＶＰＡＣ２アゴニストを発現させる間葉系幹細胞ＭＳＣの静脈内投与、または埋め込み型浸透圧ポンプによるVPAC2アゴニスト持続投与等が検討された。
ラットにコントロールＭＳＣの静脈注射を行い、血行動態へ影響が無く他に重篤は副作用が生じないことを確認した。次にMSCにVPAC2を発現されるため遺伝子導入を行うべく、レンチウイルスベクター、プラスミドベクターによる条件検討を開始した。ＶＰＡＣ２遺伝子情報を含まないコントロールベクターの導入では、レポーターであるGFPの発現がみられ、細胞内で発現されることを確認した。今後、遺伝子情報を組み込んだベクターを調整し必要なウイルス量を得る予定である。また、簡便な方法として埋め込み型浸透圧ポンプによる長期持続VPAC2アゴニスト投与の効果も検証する。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ＭＳＣに遺伝子導入する条件を検討しているが、実験に必要な条件の検討に時間を要している。同時に、アゴニストの長期投与のため、埋め込み型ポンプによる４週間の持続投与の検討も行った。

Strategy for Future Research Activity

ＶＰＡＣ２アゴニストなどの長期投与による予防、重症化抑制の効果検証のため、埋め込み型ポンプでによる方法も行っていく。

Causes of Carryover

レンチウイルスベクター作成量が間葉系幹細胞を使用することで、ex vivoで扱えるようになり、経費が当初の予定よりも少なく済んだ。

Expenditure Plan for Carryover Budget

ターゲットを制御する遺伝子を組み込んだウイルスベクター作成費用に使用する。