2015 Fiscal Year Research-status Report
羊膜上培養歯髄由来細胞シートを用いた新規骨再生医療に関する研究
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26463021
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
山本 俊郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40347472)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
雨宮 傑 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90398389)
喜多 正和 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60153087)
金村 成智 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70204542)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 培養シート / 歯髄由来細胞 / 羊膜 / 骨分化誘導 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでに、羊膜の細胞培養基質としての有用性に注目、羊膜を基質とした培養口腔粘膜上皮由来細胞シートならびに培養歯根膜由来細胞シートの作成方法を確立している。そのうち培養口腔粘膜上皮由来細胞シートは、当科にて臨床応用を行い、拒絶反応等の異常なく良好な結果を得、羊膜が細胞培養の基質として適していることを明らかにしている。
次に、歯髄由来細胞は、歯の内部に位置し外部からの有害刺激が少ないこと、従来、抜歯後に医療廃棄物として処理されていた智歯から比較的簡便に入手が可能であること、幹細胞を多く含んでいることから再生療法の細胞ソースとして有用性が高いと考えられるため、羊膜上培養歯髄由来細胞シートを作成した。今回我々は、作成した同細胞シートを骨分化誘導、ヌードマウス腰背部皮下に移植し、免疫組織学的検討を加えた。
便宜抜歯により抜去された智歯より歯髄組織のみを採取、初代培養を行った。その後継代培養、羊膜上にこれら歯髄由来細胞を播種。Control培地または骨分化誘導培地を用いて培養、羊膜上培養歯髄由来細胞シートを作成、免疫組織学的検討を行った。
次に、ヌードマウスの腰背部皮膚を切開剥離、Control培地または骨分化誘導培地を用いて作成した同細胞シートを静置、縫合した。移植後、軟X線での画像評価を行った。また、マウスより移植片を採取、免疫組織学的検討を加えた。なお本研究は、本学動物実験委員会（M25-268）で許可を受けている。
ヌードマウス腰背部皮下に移植した骨分化誘導同細胞シートは、軟X線所見にて不透過像を認め、アリザリンレッドS染色、von Kossa染色、Osteocalcin 陽性であり、移植後も石灰化した組織が維持されていることが考えられ、歯周組織再生への応用の可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の実施は、研究計画を実施するにあたり作製した交付申請書に従い、予定通り、作成した羊膜上培養歯髄由来細胞シートを実験動物へ移植、成果が得られているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
骨分化誘導した羊膜上培養歯髄由来細胞シートの臨床応用に向けて、その特性の検討と実験動物へ移植を行いエビデンスの確立をめざす。
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| Remarks |
第60回日本口腔外科学会総会・学術大会にてゴールドリボン賞を受賞
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