2016 Fiscal Year Annual Research Report
Effects of periodontal disease via serum amyloid A on aging on the mechanism of exacerbation of arteriosclerosis
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26463148
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| Research Institution | Matsumoto Dental University |
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Principal Investigator |
吉成 伸夫 松本歯科大学, 歯学部, 教授 (20231699)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小出 雅則 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (10367617)
武藤 昭紀 松本歯科大学, 歯学部, 講師 (50549433) [Withdrawn]
田口 明 松本歯科大学, 歯学部, 教授 (70243582)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 歯周炎 / 心臓血管疾患 / 老化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
加齢に伴う生物学的老化は，心臓血管疾患(cardiovascular disease: CVD)の有力な危険因子である。しかし，生物学的老化とCVDの原因となる動脈硬化症の関連メカニズムは解明されていない。本研究では，急性炎症マーカーである血清アミロイドA(SAA)，およびその受容体シグナルが血管老化に関与していると考え，1)ドナー年齢の違いによるSAA刺激下でのSAA受容体(TLR2)，接着分子，炎症関連因子発現程度の違い，2)SAA刺激による老化関連遺伝子発現を解析することにより，SAAを介する歯周病から動脈硬化症への悪化機序から，生物学的老化へのメカニズムの詳細を解明することを目的とする。
平成28年度は，ドナーが21, 27, 81歳のヒト大動脈内皮細胞(HAECs)を使用し，長期培養を行い，老化指標のβ-gal染色，蛍光測定した。SAA受容体(TLR2)，接着分子，炎症関連因子，老化マーカーのmRNA発現をリアルタイムPCR法にて測定した。詳細は以下のようである。
(1) HAECを専用培地で12穴プレートに播種し，10，20日間培養を行った。
(2) HAECへのヒトリコンビナント SAA(hSAA)の添加：培養開始後，培地交換時(2日毎)に25μg/mlの濃度のhSAAを添加し実験群とし，無添加群は対照群とした。
(3) SAA添加による SAA受容体，炎症関連因子の発現確認：(2)の細胞からmRNAを抽出，逆転写，cDNA変換，リアルタイムPCR法にてTLR2, ICAM1, VCAM1, MCP1, E-selectin P-selectin, L-selectinの発現を測定した。
(4) hSAA添加による老化マーカーの発現の確認:(3) と同様に，p53，p21の発現をリアルタイムPCR法にて測定，年齢毎の実験群と対照群で比較した。
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[Presentation] The effect of serum amyloid A for endothelial cell.2016
Author(s)
Nobuo Yoshinari, Kotaro Takahashi, Kiyohito Kaise, Murtaza Saleem, Yuki Ozaki, Suguru Nakamura, Keita Kubokawa, Yuichi Ishihara
Organizer
The 94th Annual Meeting of International Association for Dental Research
Place of Presentation
COEX Convention Center(Seoul, Korea)
Year and Date
2016-06-24
Int'l Joint Research
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