2016 Fiscal Year Annual Research Report
Basic research on regulatory system for self-renewal and differentiation of hematopoietic stem cells for the purpose of future application to regenerative medicine
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26501004
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
安永 晋一郎 福岡大学, 医学部, 教授 (50336111)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大野 芳典 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教 (10548986)
瀧原 義宏 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (60226967)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 再生医学 / 造血幹細胞 / 自己複製 / 細胞周期 / 細胞増殖 / 細胞分化 / Geminin / ユビキチン化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までに、細胞ソーティング法により、Geminin-EYFPノックインマウスの骨髄細胞から造血幹細胞を分画し、Gemininの発現レベルによりさらに亜分画に分けた。このマウスにBrdUを投与し細胞周期解析を行いCD34-KSL Geminin-high細胞がS/G2/M期の細胞であることを確認した。次に単離したCD34-KSL Geminin-high細胞を致死的放射線照射したマウスに移植し、移植細胞から細胞周期の各期にある造血幹細胞が出現すること、そしてさらに各細胞系譜の前駆細胞や成熟血球細胞が長期にわたって生み出されることを確認し、CD34-KSL Geminin-high細胞が機能的にも自己複製中の造血幹細胞であることを確認した。そして、それらの分画における造血幹細胞や前駆細胞のマーカー遺伝子群や自己複製と分化の制御に重要とされる遺伝子群の発現をFludigm社のシングルセルRT-PCRシステムを用いて解析を行った。本年度は、幹細胞マーカーのみならず、アポトーシス、細胞生存シグナル、相同組換え修復、非相同組換え修復、p53関連、DNA複製ライセンス化、細胞周期などのマーカーを加え、幅広くシングルセルの遺伝子発現情報を収集した（論文準備中）。一方、Geminin-EYFPノックイン細胞に導入することを目的に、赤色蛍光をマーカーにしたレトロウイルスベクターを用いたGeminin発現操作系の作成を試みた。しかし、赤色蛍光マーカーは細胞毒性が問題となり、高発現を維持する赤色マーカーを持ったレトロウイルスシステムの作成は難航した。そこで別のGeminin発現操作法として膜透過型リコンビナントGemininタンパク質の有用性に着目し、Gemininタンパク質の細胞内への迅速な誘導と迅速な消退が可能であることを証明し、論文を作成した（PLoS One 2016）
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[Journal Article] Is a bare-metal stent still useful for improving the outcome of percutaneous coronary intervention? From the FU-Registry.2017
Author(s)
Gondo K., Ike A., Ogawa M., Shirai K., Sugihara M., Nishikawa H., Iwata A., Kawamura A., Mori K., Zhang B., Miura S., Yasunaga S. & Saku K.
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Journal Title
J. Cardiol.
Volume: 69(4)
Pages: 652-659
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Effect of low dose-rate irradiation on the hematopoietic system.2017
Author(s)
Ohno Y. , Shirasu N., Suzuki-Takedachi K., Santo M.,Guo Y., Kanno M., Yasunaga S., Ohtsubo M. , Takihara Y.
Organizer
The 1st International Symposium of the network-type Joint Usage/Research Center for Radiation Disaster Medical Science
Place of Presentation
Hiroshima, Japan
Year and Date
2017-02-21 – 2017-02-22
Int'l Joint Research
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[Presentation] Effect of low dose-rate irradiation on the hematopoietic system.2016
Author(s)
Ohno Y., Suzuki-Takedachi K., , Santo M., Guo Y., Kanno, Yasunaga S., Ohtsubo M., Naka K., Takihara Y.
Organizer
The 14th Stem Cell Research Symposium
Place of Presentation
Awaji, Japan
Year and Date
2016-05-20 – 2016-05-21
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