色素性乾皮症A群患者における進行性神経障害の機構解析

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26550042
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 森 俊雄 奈良県立医科大学, 医学部, 研究教授 (10115280)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 酸化的DNA損傷 / サイクロプリン / 色素性乾皮症 / 神経障害 / 酵素標識免疫法 / ヌクレオチド除去修復 / 活性酸素

Outline of Annual Research Achievements

色素性乾皮症A群(XP-A)患者に発症する進行性神経障害が酸化的DNA損傷サイクロプリンの蓄積による神経細胞死と関連するかを検討するため、同損傷に特異的結合を示すモノクローナル抗体(CdA-1)を世界で初めて作製した。性格付け実験の結果、CdA-1抗体はDNA中の8,5'-cyclo-2'-deoxyadenosine (cyclo-dA)に特異的に結合することがわかった。また、同抗体を用いた酵素標識免疫法により、オリゴヌクレオチド中のcyclo-dA量とそれらに対する抗体結合量の間に直線関係が成立することがわかった。さらに、窒素下でのX線照射やフェントン反応処理によりDNA中に効率よくcyclo-dAが誘発されることを免疫学的定量測定法で明らかにした。加えて、蛍光免疫染色法により、cyclo-dA含有オリゴヌクレオチドを導入したヒト骨肉腫細胞においてcyclo-dAを可視化することにも成功した。
以上のように、翌年度からのXP-A患者やXP-Aマウスの組織を用いた本格実験に向けた基本技術が完成した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ほぼ計画通りに進展しているため。

Strategy for Future Research Activity

研究計画に基づき、XP-A患者やXP-Aマウスの組織中のcyclo-dAを定量測定する。

Research Products

• [Journal Article] Functional regulation of the DNA damage-recognition factor DDB2 by ubiquitination and interaction with xeroderma pigmentosum group C protein. (2015)
  • Author(s): S. Matsumoto, E.S. Fischer, T. Yasuda, N. Dohmae, S. Iwai, T. Mori, R. Nishi, K. Yoshino, W. Sakai, F. Hanaoka, N.H. Thoma, and K. Sugasawa.
  • Journal Title: Nucleic Acids Res. Volume: 43 Pages: 1700-1713
  • DOI: 10.1093/nar/gkv038
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Quantitative and in situ detection of oxidatively generated DNA damage 8,5’-cyclo-2’-deoxyadenosine using an immunoassay with a novel monoclonal antibody. (2014)
  • Author(s): T. Iwamoto, P.J. Brooks, T. Nishiwaki, K. Nishimura, N. Kobayashi, S. Sugiura and T. Mori.
  • Journal Title: Photochem. Photobiol. Volume: 90 Pages: 829-836
  • DOI: 10.1111/php.12239
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 新規モノクローナル抗体を用いた酸化的DNA損傷サイクロプリンの定量測定と可視化 (2014)
  • Author(s): 森 俊雄、岩本顕聡、小林信彦、杉浦重樹
  • Organizer: 日本放射線影響学会第57回大会
  • Place of Presentation: 鹿児島
  • Year and Date: 2014-10-01 – 2014-10-03
• [Presentation] Quantitative and in situ detection of oxidatively generated DNA damage 8,5’-cyclo-2’-deoxyadenosine using an immunoassay with a novel monoclonal antibody (2014)
  • Author(s): T. Iwamoto, P.J. Brooks, N. Kobayashi, S. Sugiura and T. Mori
  • Organizer: 16th International Congress on Photobiology
  • Place of Presentation: Cordoba, Argentina
  • Year and Date: 2014-09-08 – 2014-09-12
• [Presentation] 新規モノクローナル抗体を用いた酸化的DNA損傷サイクロプリンの定量測定と可視化 (2014)
  • Author(s): 岩本顕聡、P.J. Brooks、小林信彦、杉浦重樹、森 俊雄
  • Organizer: 第36回日本光医学・光生物学会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2014-07-25 – 2014-07-26
• [Remarks] 奈良県立医科大学ラジオアイソトープ(RI)実験施設
  • URL: http://www.naramed-u.ac.jp/university/kenkyu-sangakukan/radioisotope/radioisotope.html