色素性乾皮症A群患者における進行性神経障害の機構解析

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26550042
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 森 俊雄 奈良県立医科大学, 医学部, 研究教授 (10115280)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 酸化的DNA損傷 / サイクロプリン / 色素性乾皮症 / 神経障害 / 活性酸素 / ヌクレオチド除去修復 / モノクローナル抗体

Outline of Annual Research Achievements

色素性乾皮症A群（XP-A）が発症する進行性の神経障害が酸化的DNA損傷サイクロプリンの蓄積による神経細胞死と関連するかを検討するため、8,5’-cyclo-2’-deoxyadenosine（Cyclo-dA）に特異結合するモノクローナル抗体（CdA-1）を世界で初めて作製した。昨年度の研究において、CdA-1のCyclo-dA特異性を十分に証明した後、ELISA法に応用し、100,000塩基あたり1個の検出感度を持つサイクロプリン定量系を確立した。本年度の研究において、サンプルDNAのプレート付着量、CdA-1の処理濃度、CdA-1溶解液中の塩濃度などを最適化することにより、検出感度を10倍高め1,000,000塩基あたり1個とした。この改良型ELISAを用いて5ヶ月齢から29ヶ月齢の野生型およびXP-Aマウス間におけるサイクロプリン蓄積量を比較した結果、増殖の早い精巣では差が見られないが、脳ではXP-Aマウスが有意に多量の損傷を蓄積していることがわかった。この結果は、XP-Aの神経障害がサイクロプリンの蓄積と関係する仮説と矛盾しない。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

マウス臓器におけるサイクロプリンを定量するため、検出感度を10倍高めるのに時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

若い野生型およびXP-Aマウス(1ヶ月齢など)臓器におけるサイクロプリン蓄積量を定量比較し、どの時期から損傷量に差が生じるか明らかにする。
また、XP-A患者脳においても健常人に比べサイクロプリン蓄積量が多いか剖検サンプルを用いて検討する。

Research Products

• [Journal Article] In vivo spectrum of UVC-induced mutation in mouse skin epidermis may reflect the cytosine deamination propensity of cyclobutane pyrimidine dimers. (2015)
  • Author(s): H. Ikehata, T. Mori and M. Yamamoto
  • Journal Title: Photochem. Photobiol. Volume: 91 Pages: 1488-1496
  • DOI: 10.1111/php.12525
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] SUMOylation of xeroderma pigmentosum group C protein regulates DNA damage recognition during nucleotide excision repair. (2015)
  • Author(s): M. Akita, Y.-S. Tak, T. Shimura, S. Matsumoto, Y. Okuda-Shimizu, Y. Shimizu, R. Nishi, H. Saitoh, S. Iwai, T. Mori, K. T. Ikura, W. Sakai, F. Hanaoka, and K. Sugasawa.
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 5 Pages: 10984
  • DOI: 10.1038/srep10984
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Functional regulation of the DNA damage-recognition factor DDB2 by ubiquitination and interaction with xeroderma pigmentosum group C protein. (2015)
  • Author(s): S. Matsumoto, E.S. Fischer, T. Yasuda, N. Dohmae, S. Iwai, T. Mori, R. Nishi, K. Yoshino, W. Sakai, F. Hanaoka, N.H. Thoma, and K. Sugasawa.
  • Journal Title: Nucleic Acids Res. Volume: 43 Pages: 1700-1713
  • DOI: 10.1093/nar/gkv038
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] DNA修復異常疾患（XP/CS/TTD）の病態と細胞/分子レベルの特性との関連 (2015)
  • Author(s): 森 俊雄
  • Organizer: 第37回日本光医学・光生物学会
  • Place of Presentation: 宮崎
  • Year and Date: 2015-07-17 – 2015-07-18
• [Presentation] Quantitative detection of oxidative DNA damage 8,5’-cyclo-2’-deoxyadenosine using an immunoassay with a novel monoclonal antibody (2015)
  • Author(s): T. Mori, T. Iwamoto, P. J. Brooks, N. Kobayashi and S. Sugiura
  • Organizer: 15th International Congress of Radiation Research
  • Place of Presentation: Kyoto
  • Year and Date: 2015-05-25 – 2015-05-29
  • Int'l Joint Research
• [Book] 光老化科学の最前線、第10章 DNA損傷の定量測定と可視化 (2015)
  • Author(s): 森 俊雄 (前田憲寿監修)
  • Total Pages: 301
  • Publisher: シーエムシー出版