2015 Fiscal Year Annual Research Report
細胞死による積極的な肝機能維持・再生制御機構の解明と臨床応用に向けた研究
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26670591
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
伊 敏 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40292007)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
芳賀 早苗 北海道大学, 保健科学研究院, 博士研究員 (60706505)
野田 なつみ 東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 研究員 (30624358)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 再生 / 細胞死 / 機能維持 / イメージング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
「細胞生存」と「細胞自体により制御される細胞死」に対するいくつかの光プローブのデザインと作製を前年度に引き続き行った。細胞生存に対する光プローブは、生存シグナルの中心的な細胞内分子Aktの活性化をモニターするための光プローブのデザイン・作製（昨年度終了）と細胞によるプローブ機能評価（当該年度施行）を行った。細胞自体により制御される細胞死に対する光プローブは、主としてアポトーシス、ネクロプトーシス（プログラムされたネクローシス）に焦点を絞り研究を進めた。
1 初年度に作製したAkt機能プローブに関しては、光プローブのリンカー部分の長さを調整するなどマイナーチェンジを行い、そのシグナル強度の改善を試みた。その後、それぞれ細胞レベルで再度評価実験を行ったところ、現時点では更なる改善が必要と判断された。
2 アポトーシスに対するプローブ（カスパーゼ３活性）に関しては、細胞実験による評価で、十分な感受性・特異性とシグナル強度を認めた。そのため、マウス実験に移行した。マウス肝に導入した光プローブにより、マウス肝傷害モデル、肝炎誘導モデル等によるカスパーゼ３活性（つまり、アポトーシスによる細胞死）と肝傷害との関係を解析した。その結果、マウス肝におけるアポトーシスの動的評価を行うとともに、その病態における意義を解析することが出来た。今後は種々の細胞死、または病態におけるアポトーシスの役割を検討する予定である。
3 ネクロプトーシス評価に対する光プローブをデザインし、作製した。RIP1/RIP3の二量体化に対するプローブを作製し、細胞内にて発現させることに成功した。現在細胞実験における評価を開始した。
４オートファジー死を評価するための光プローブ（p62/SQSTM1遺伝子のレポーター）を作製した。現在細胞への遺伝子導入実験を行っている。
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