肺癌幹細胞因子の同定とその特性を標的とした分子標的治療薬の開発

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26670625
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 鈴木 元 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80236017)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 福井 高幸 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (70463198) ; 若原 恵子 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (00631433) ; 加藤 省一 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30584669) ; 西田 篤司 千葉大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (80130029)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 肺がん / がん幹細胞

Outline of Annual Research Achievements

１．候補タンパク質の肺癌幹細胞特性に対する機能を明らかにする。
がん幹細胞因子の抽出と腫瘍形成に対する影響：癌幹細胞の一つの特徴は少数の細胞で腫瘍形成を行うことである。候補遺伝子が癌幹細胞因子か否か決定するため、臨床検体由来肺癌幹細胞を用いて以下の実験を行った。
臨床検体を一旦ゼノグラフトとしてマウスに移植、腫瘍サイズを増大した。ゼノグラフト回収後、コラゲナーゼ処理、癌幹細胞培養条件下で培養した。CD166ソーティングによって癌幹細胞を濃縮、1000個の細胞をマウスに移植。腫瘍形成の有無を観察した。平成27年度中に40検体を用いて実験を実施したが培養細胞系に持っていける腫瘍はなかった。一方、平成27年度中に樹立した細胞株においては、皮下腫瘍にくわえ、肺転移モデルとして用いることが可能であった。さらに、ゼノグラフトよりの腫瘍の回収条件、細胞培養条件あるいは、ショートヘアピンコンストラクトなどに関して各種条件検討を行った結果、この細胞を用いた特定遺伝子のノックダウンが可能となった。ノックダウン後の細胞についてはさらにCD166陽性細胞をFACSにて回収し一定数をマウス皮下及び尾静脈より接種した。これらマウスにおける腫瘍形成能の有無については現在も引き続き観察を行っている。
2.　 肺癌幹細胞に対する分子標的治療薬開発を行う。
644化合物種からなる低分子化合物ライブラリーを用いてスクリーニングを行い、標的候補タンパク質の酵素活性に対する阻害剤をスクリーニングした。一化合物及びその類縁体で阻害活性を有する化合物がえられた。引き続きそれら化合物を元に至適化を行っている。

Research Products

• [Journal Article] Effect of pH on the misincorporation rate of DNA polymerase eta (2016)
  • Author(s): Nishimoto N, Suzuki M, Izuta S
  • Journal Title: Biol Pharm Bull Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Resveratrol-induced transcriptional up-regulation of ASMase (SMPD1) of human leukemia and cancer cells (2016)
  • Author(s): Mizutani N, Omori Y, Kawamoto Y, Sobue S, Ichihara M, Suzuki M, Kyogashima M, Nakamura M, Tamiya-Koizumi K, Nozawa Y, Murate T
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun Volume: 470 Pages: 851-856
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.01.134
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] ROR1 sustains caveolae and survival signalling as a scaffold of cavin-1 and caveolin-1 (2016)
  • Author(s): Yamaguchi T, Lu C, Ida L, Yanagisawa K, Usukura J, Cheng J, Hotta N, Shimada Y, Isomura H, Suzuki M, Fujimoto T, Takahashi T
  • Journal Title: Nat Commun Volume: 7 Pages: 10060
  • DOI: doi: 10.1038/ncomms10060
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Targeting ceramide synthase 6-dependent metastasis-prone phenotype in lung cancer cells (2016)
  • Author(s): Suzuki M, Cao K, Kato S, Komizu Y, Mizutani N, Tanaka K, Arima C, Tai MC, Yanagisawa K, Togawa N, Shiraishi T, Usami N, Taniguchi T, Fukui T, Yokoi K, Wakahara K, Hasegawa Y, Mizutani Y, Igarashi Y, Inokuchi J他
  • Journal Title: J Clin Invest Volume: 126 Pages: 254-265
  • DOI: 10.1172/JCI79775
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1, a target of NKX2-1/TTF-1 lineage-survival oncogene, inhibits apoptosis signal-regulating kinase 1-mediated pro-apoptotic signaling in lung adenocarcinoma (2016)
  • Author(s): Ida L, Yamaguchi T, Yanagisawa K, Kajino T, Shimada Y, Suzuki M, Takahashi T
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 107 Pages: 155-161
  • DOI: 10.1111/cas.12858
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Increased acid ceramidase expression depends on upregulation of androgen-dependent deubiquitinases, USP2, in a human prostate cancer cell line, LNCaP (2016)
  • Author(s): Mizutani N, Inoue M, Omori Y, Ito H, Tamiya-Koizumi K, Takagi A, Kojima T, Nakamura M, Iwaki S, Nakatochi M, Suzuki M, Nozawa Y, Murate T
  • Journal Title: J Biochem Volume: 158 Pages: 309-319
  • DOI: 10.1093/jb/mvv039
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] miR-342-3p regulates MYC transcriptional activity via direct repression of E2F1 in human lung cancer (2016)
  • Author(s): Tai MC, Kajino T, Nakatochi M, Arima C, Shimada Y, Suzuki M, Miyoshi H, Yatabe Y, Yanagisawa K, Takahashi T
  • Journal Title: Carcinogenesis Volume: 36 Pages: 1464-1473
  • DOI: 10.1093/carcin/bgv152
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Increased SPHK2 Transcription of Human Colon Cancer Cells in Serum-Depleted Culture: The Involvement of CREB Transcription Factor (2015)
  • Author(s): Mizutani N, Omori Y, Tanaka K, Ito H, Takagi A, Kojima T, Nakatochi M, Ogiso H, Kawamoto Y, Nakamura M, Suzuki M, Kyogashima M, Tamiya-Koizumi K, Nozawa Y, Murate T
  • Journal Title: J Cell Biochem Volume: 116 Pages: 2227-2238
  • DOI: 10.1002/jcb.25173
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 1.Targeting CERS6-dependent Sphingolipid Pathway in Lung Cancer Cells (2015)
  • Author(s): Motoshi Suzuki, Takashi Murate, Mamoru Kyogashima and Takashi Takahashi
  • Organizer: 第74回日本癌学会総会
  • Place of Presentation: 愛知県名古屋市名古屋国際会議場
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-08