2014 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝性網膜疾患カニクイザルの作製とその病理学的解析
Project/Area Number |
26670762
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Research Institution | 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) |
Principal Investigator |
岩田 岳 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター), 分子細胞生物学研究部, 部長 (90374157)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
溝田 淳 帝京大学, 医学部, 教授 (10239262)
下澤 律浩 独立行政法人医薬基盤研究所, 霊長類医科学研究センター, 研究員 (50300786)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2015-03-31
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Keywords | 医歯薬学 / 外科系臨床医学 / 眼科学 / 眼生化学・分子生物学 / カニクイザル |
Outline of Annual Research Achievements |
ヒトと同じ眼球構造を持つカニクイザルにおいて眼疾患モデル動物を作成するために、カニクイザル受精卵へCRISPR/Cas9システムを用いたゲノム編集技術を応用した。FSHおよびhCGを雌ザルに投与し、成熟卵子を回収した。また、精子は採取した射出精液を洗浄し、回収した。顕微授精により雄雌前核を持つ受精卵を作出し、この前核に目的の眼疾患遺伝子の変異を誘導するように構築したCRISPR/Cas9発現ベクターを注入した。このベクター注入卵について体外培養および胚移植を行った。体外培養したベクター注入卵は胚盤胞に発生し、これからES細胞が樹立された。このES細胞において目的遺伝子の変異が誘導されていることが確認された。また、ベクター注入卵の胚移植を行ったところ、2個体で妊娠が成立した。その内1個体は流産したものの、1個体が妊娠を継続し、雌の新生児を得るに至った。しかしながら、新生児血液や胎盤などで目的遺伝子の変異は確認できなかった。ES細胞で変異が誘導されたことから、実験を継続することで遺伝子変異を持つカニクイザルが得られることが期待される。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Whole exome analysis identifies frequent CNGA1mutations in Japanese population with autosomal recessive retinitis pigmentosa.2014
Author(s)
Katagiri S, Akahori M, Sergeev Y, Yoshitake K, Ikeo K, Furuno M, Hayashi T, Kondo M, Ueno S, Tsunoda K, Shinoda K, Kuniyoshi K, Tsurusaki Y, Matsumoto N, Tsuneoka H, Iwata T.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 9
Pages: e108721
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Novel C8orf37 mutations in patients with early-onset retinal dystrophy, macular atrophy, cataracts, and high myopia.2014
Author(s)
Katagiri S, Hayashi T, Yoshitake K, Akahori M, Ikeo K, Gekka T, Tsuneoka H, Iwata T.
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Journal Title
Ophthalmic Genetics
Volume: 12
Pages: 1-8
Peer Reviewed
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