2015 Fiscal Year Research-status Report
臨床および家畜における薬剤耐性菌の実態解明とその関連性の解明
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26860773
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Research Institution | Nara Medical University |
Principal Investigator |
中野 竜一 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (80433712)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | 薬剤耐性菌 / 臨床分離耐性菌 / 家畜由来耐性菌 / セフェム系薬耐性大腸菌 / CTX-M型 β-ラクタマーゼ / LAMP法 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究では臨床などで蔓延する薬剤耐性菌の出現背景を包括的に解明すべく、臨床ならびに家畜から分離される薬剤耐性菌を対象に解析を行った。本年度は特にセフェム系薬に耐性を示すCTX-M型 β-ラクタマーゼ産生大腸菌について、家畜由来株と臨床分離株の特徴を分子遺伝学的手法により明らかにした。さらに臨床現場で問題となっているカルバペネマーゼ産生菌の迅速検出法の開発を試みた。 ①臨床と家畜におけるセフェム系薬耐性菌の実態解明 昨年度に引き続き、牛、豚を対象とした家畜ならびにその農家の糞便を収集し、グラム陰性菌の分離同定を行った。分離された菌種は大腸菌(246株)が最も多く、セフェム系薬耐性大腸菌の耐性遺伝子を解析したところ、そのほとんどがCTX-M型遺伝子を保有していた。臨床分離株と比較したところ、家畜由来株(36株10遺伝子)、臨床分離株(120株15遺伝子)共にCTX-M-14遺伝子がその多くを占めていた。しかし、CTX-M-14以外のCTX-M型遺伝子の分布やゲノム型別ならびにプラスミド型別がそれぞれ異なっていることが判った。これまでのデータから家畜から臨床への伝播の推測を関連付ける明らかな情報は得られなかった。 ②カルバペネマーゼ産生菌の迅速検出法の開発 臨床現場で特に問題とされているカルバペネマーゼ産生菌について、遺伝子増幅技術であるLAMP法を用いてその耐性遺伝子を迅速に検出できる方法を開発した。日本では報告が少ないが米国などのカルバペネム耐性腸内細菌科の多くから分離されるKPC型遺伝子と、日本で検出される多剤耐性アシネトバクターの多くが保有するOXA-51型遺伝子をそれぞれ対象とした。いずれも感度、特異度ともに高く、迅速性にも優れていることが判った。臨床分離株においてもその有効性が確認されたため、臨床現場で十分活用できるものと期待できた。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
家畜および臨床からの検体収集では多くの協力を得ることができ、予定通りに研究を行うことができた。迅速検出法の開発では順調にデータを得ることができた。これら研究成果の一部について、学会や学術論文にて発表した。
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Strategy for Future Research Activity |
これまで得られた検体について、さらに分子遺伝学的解析を進めデータを蓄積する。特にセフェム系薬耐性菌について、家畜と臨床での違いに着目して解析していく予定である。さらにメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)についても分子疫学解析を行い、不明であった家畜から分離されるMRSAの実態を明らかにする。また、カルバペネマーゼ産生菌など臨床現場で問題となっている耐性菌についても引き続き注目して行く予定である。
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Causes of Carryover |
3つの実験テーマのうちの1つを次年度に集中して行うため。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
分子遺伝学的解析のため費用を必要としている。さらに国際学会にて、実験成果を報告する予定である。
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[Journal Article] Loop-mediated isothermal amplification: rapid and sensitive detection of the antibiotic resistance gene ISAba1-blaOXA-51-like in Acinetobacter baumannii2016
Author(s)
R Nakano, X Mu, A Nakano, T Ubagai, T Kikuchi-Ueda, S Tansho-Nagakawa, H Kikuchi, G Kamoshida, S Endo, H Yano, Y Ono
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Journal Title
Journal of Microbiological Methods
Volume: 121
Pages: 36-40
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Presentation] Identification and molecular characterization of New Delhi Metallo-β-Lactamase-producing Enterobacteriaceae strains isolated in Japan2015
Author(s)
R Nakano, A Nakano, K Hikosaka, S Kawakami, N Matsunaga, M Asahara, S Ishigaki, T Furukawa, M Suzuki, K Shibayama, Y Ono
Organizer
ECCMID2015
Place of Presentation
Copenhagen, Denmark
Year and Date
2015-04-25 – 2015-04-28
Int'l Joint Research
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