2014 Fiscal Year Research-status Report
遺伝子改変酵素群APOBECはHPV感染における発癌因子か？
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26861318
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
若江 亨祥 金沢大学, 医学系, 助教 (70638303)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | HPV / APOBEC / 変異 / 子宮頸癌 / pseudovirion |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はHPV16陽性細胞株を用いて、APOBECがインターフェロンβによって誘導され、HPV16 E2遺伝子にC-to-T/G-to-A hypermutationを導入する事を以前報告した。そのような現象がin vivoでも起きているのか検討するため、HPV16陽性子宮頸部異形成検体を用いてHPVゲノムの変異解析を行った。その結果、細胞株で得られた知見と同様、HPV16 E2遺伝子にもhypermutationが検出される事を発見し報告した。すなわちAPOBECによるE2のhypermutationIがin vivoでも起きている事が示唆された。
さらに、これまでの変異解析は3D-PCRというPCRの変法を用いて行ってきたが、新たに次世代シーケンスを用いた変異解析方法を立ち上げた。この方法でHPV16陽性異形成検体を解析した結果、E2以外の広い遺伝子領域にhypermutationが入っている事を示した（投稿準備中）。
一方で、HPVウイルス粒子の形成におけるAPOBECの役割についても検討を始めた。Pseudovirion(PsV)を用いた実験系で、PsV産生細胞でAPOBECを強制発現させる事でPsVの感染性が低下する事を発見した。さらにHPV16キャプシド蛋白であるL1にAPOBECはin vitoで結合する事をあわせて報告した。以上の知見はAPOBECがカプシド蛋白への結合を介してPsVの感染性を低下させている可能性を示唆した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体を用いたウイルスゲノムの変異解析の結果、hypermutationが広範囲に見つかった事は順調な成果といえる。ゲノム不安定性やウイルスゲノムのインテグレーションを評価するin vitroの系は立ち上げに時間がかかっているが引き続き取り組んでゆく。立ち上がり次第マウスへの移植の実験系も立ち上げたい。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続きAPOBECによるゲノム不安定性惹起やHPV16ゲノムのインテグレーションを評価するin vitroの系を立ち上げる。初代表皮細胞へのHPV16ゲノムの遺伝子導入以外に、不死化表皮細胞へのHPV16ゲノムの導入、さらにエピソーム型HPV16を持つ細胞株W12を代わりに使う事も視野にいれ進めて行く。臨床検体についてもAPOBECの発現と変異蓄積やインテグレーションの相関について引き続きデータを蓄積する。
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| Causes of Carryover |
41533円の未使用額が生じたが、翌年度に使用する事が効率的と考えた為H27年に持ち越しをした。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
41533円の未使用額は消耗品購入等にあてる。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] APOBEC3A and 3C decrease human papillomavirus 16 pseudovirion infectivity.2015
Author(s)
Ahasan MM, Wakae K, Wang Z, Kitamura K, Liu G, Koura M, Imayasu M, Sakamoto N, Hanaoka K, Nakamura M, Kyo S, Kondo S, Fujiwara H, Yoshizaki T, Mori S, Kukimoto I, Muramatsu M
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun
Volume: 457
Pages: 295-299
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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