遺伝子改変酵素群APOBECはHPV感染における発癌因子か？

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26861318
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 若江 亨祥 金沢大学, 医学系, 助教 (70638303)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: HPV / APOBEC / 子宮頸癌 / hypermutation

Outline of Annual Research Achievements

我々は遺伝子改編酵素群AID/APOBECのHPV感染病態における役割について研究を進めている。これまでにAPOBC3はHPV遺伝子に変異を導入する事をin vitroで示した (Wang et al. J. Virol. 2014)。またHPVのウイルス粒子の感染性を低下させる事を示した(Ahasan et al. Biochem Biophys Res Commun. 2015)。
本年度は遺伝子改編酵素群AID/APOBECがHPV16 E2遺伝子に連続するC-to-U変異(hypermutation)を、in vivoで導入する事を、子宮頸部異形成検体を用いて示した。hypermutationはE2以外にもHPV早期遺伝子の広範囲に導入され、Long Control Regionなど特定の領域に集中する傾向がある事も見いだした（Kukimoto et al., J. Med Virol. 2015及びWakae et al. Virology 2015）。
またHPV16(+)子宮異形成組織由来細胞株W12を用いて、double strand break及びインテグレーションが高カルシウム培地にて誘導されるという予備的知見を得ており、さらに検討を進めている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

APOBECによりHPVゲノムにhypermutationがin vivoで導入される事を示せた事は順調な成果と言える。またインテグレーションやDNA損傷について評価する系についてもW12を用いて立ち上がる目処が立っており、引き続き取り組んで行く。

Strategy for Future Research Activity

W12の系を用いて、引き続きAPOBECの発現と、ゲノム不安定性やインテグレーションの惹起の相関及びメカニズムについて検討を進める。また不死化表皮細胞などよりprimaryに近い系でも実験系の立ち上げを試みる。臨床検体についてもAPOBECの発現量とインテグレーションの相関についてデータを引き続き蓄積する。

Causes of Carryover

４６１９７円の未使用額が生じたが、翌年度に使用する事が効率的と考えたため、平成２８年度に持ち越しにした。

Expenditure Plan for Carryover Budget

４６１９７円の未使用額は消耗費購入等にあてる。

Research Products

• [Journal Article] TGF-β Suppression of HBV RNA through AID-dependent Recruitment of an RNA Exosome Complex (2015)
  • Author(s): Guoxin Liang, Guangyan Liu, Kouichi Kitamura, Zhe Wang, Sajeda Chowdhury, Ahasan Md Monjurul, Kousho Wakae, Miki Koura, Miyuki Shimadu, Kazuo Kinoshita, and Masamichi Muramatsu
  • Journal Title: Plos Pathogen Volume: 11 Pages: e1004780
  • DOI: 10.1371/journal.ppat.1004780.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Hypermutation in the E2 gene of human papillomavirus type 16 in cervical intraepithelial neoplasia. (2015)
  • Author(s): Kukimoto I, Mori S, Aoyama S, Wakae K, Muramatsu M, Kondo K.
  • Journal Title: Journal of Medical Virology Volume: 87 Pages: 1754-1760
  • DOI: 10.1002/jmv.24215.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Detection of hypermutated human papillomavirus type 16 genome by Next-Generation Sequencing. (2015)
  • Author(s): Wakae K, Aoyama S, Wang Z, Kitamura K, Liu G, Monjurul AM, Koura M, Imayasu M, Sakamoto N, Nakamura M, Kyo S, Kondo S, Fujiwara H, Yoshizaki T, Kukimoto I, Yamaguchi K, Shigenobu S, Nishiyama T, Muramatsu M.
  • Journal Title: Virology Volume: 485 Pages: 460-466
  • DOI: 10.1016/j.virol.2015.08.017.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ヒトパピローマウイルス発癌病態における遺伝子改編酵素群APOBECの役割 (2015)
  • Author(s): 若江 亨祥、青山 慧、王 哲、喜多村 晃一、劉 光炎、アハサン・ムハンマド・モンジュルル、小浦 美樹、今康 美依子、坂本 直也、中村 充広、京 哲、近藤 悟、 藤原 浩、吉崎 智一、柊元 巌、山口 勝司、重信 秀治、西山 智明、村松 正道
  • Organizer: 第２回ライフサイエンス交流交流セミナー
  • Place of Presentation: 金沢大学付属病院
  • Year and Date: 2015-12-08
• [Presentation] Epsilon RNA is required for AID-mediated reduction of HBV transcripts (2015)
  • Author(s): Que Lusheng, Kousho Wakae, Koichi Kitamura, Masamichi Muramatsu
  • Organizer: BMB 2015
  • Place of Presentation: 神戸国際展示場
  • Year and Date: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [Presentation] Epsilon RNA plays an important role for AID-mediated downregulation of HBV transcripts (2015)
  • Author(s): Liu Guangyan, Kousho Wakae, Koichi Kitamura, Masamichi Muramatsu
  • Organizer: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場
  • Year and Date: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [Presentation] APOBEC3Hの多型とB型肝炎ウイルス複製阻害活性の検討 (2015)
  • Author(s): 坂本直也、若江亨祥、喜多村晃一、村松正道
  • Organizer: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場
  • Year and Date: 2015-11-22 – 2015-11-24
• [Presentation] Next Generation Sequencing detects APOBCEC3 mediated Hypermutation in Human Papillomavirus Type 16 Genome in vivo (2015)
  • Author(s): Kosho Wakae, Mitsuhiro Nakamura, Satoru Kondo, Hiroshi Fujiwara, Tomokazu Yoshizaki, Iwao Kukimoto, Tomoaki Nishiyama, and Masamichi Muramatsu
  • Organizer: 2015 DNA tumor virus Meeting
  • Place of Presentation: Congress Centre of the Stazione Marittina, Italy
  • Year and Date: 2015-07-24 – 2015-07-24
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 子宮頸部異形成におけるHPV16ゲノム hypermutationの検出 (2015)
  • Author(s): 若江 亨祥, 青山 慧, 王 哲, 喜多村 晃一, 劉 光炎, アハサン=ムハンマド=モンジュルル, 中村 充宏, 藤原 浩, 柊元 巌, 山口 勝司, 重信 秀治, 西山 智明, 村松 正道
  • Organizer: 次世代シーケンス現場の会
  • Place of Presentation: つくば国際会議場
  • Year and Date: 2015-07-01 – 2015-07-03
• [Presentation] APOBEC3はHPV16 Pseudovirionの感染性を低下させる (2015)
  • Author(s): 若江亨祥、Ahasan M Monjurul、王哲、喜多村晃一、森清一郎、柊元巌、中村充宏、藤原浩、村松正道
  • Organizer: 第３３回生化学会北陸支部大会
  • Place of Presentation: 富山大学杉谷キャンパス
  • Year and Date: 2015-05-23