1986 Fiscal Year Annual Research Report
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60065004
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
岡本 宏 東北大, 医学部, 教授 (60025632)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 博 東北大学, 医学部, 助教授 (00115198)
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| Keywords | VIP遺伝子 / TATA box / プロモーター / prepro VIP mRNA / rig(rat insulinoma gene) / インスリノーマ / 種間保存 / genomic ライブラリー |
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| Research Abstract |
1.1)ヒトVIP遺伝子の調節領域を明らかにした。すなわち、約2,000塩基対のヒトVIP遺伝子5´隣接領域の全構造を決定した結果、転写開始部位から28,145,772,900塩基対上流に4個のTATAboxが見出され、このうち28塩基対上流のTATAboxがcyuLic AMPとphorbol estersで誘導されるプロモーターとして同定された。
2)ラット脳、腸から作製したcDNAライブラリーよりVIPcDNAクローンを単離し構造解析を行った結果、腸では1種類のprepro VIP mRNAしか存在しないが、脳では5´非翻訳配列の異なる3種類のprepro VIP mRNAが存在することが見出された。3種類のPrepro VIP mRNAの5´端をコードするエクソンは、ヒトVIP遺伝子との比較から上述の28,145,900塩基対上流のTATA boxの下流に位置するものと推定され、VIP遺伝子の発現がプロモーターの使い分けにより調節される可能性が考えられた。
2.1)BKウイルスで誘発したハムスターインスリノーマ、手術摘出ヒトインスリノーマから作製したcDNAライブラリーよりrig(rat insulinoma gene)homologuesを単離しその構造を決定した。その結果、ラット・ハムスター・ヒトrigの構造は、塩基配列で90%以上、コードする145アミノ酸の配列では100%一致し、rigはその構造が進化上きわめてよく保持されてきた遺伝子であることが明らかにされた。
2)ラットインスリノーマからgenomicライブラリーを作製しrig遺伝子を単離した。rig遺伝子は全長約4,000塩基対で3個のエクソンと2個のイントロンから構成されることが推定された。
本年度購入の細胞自動解析分離装置(セルソーターシステム)、DNAシークエンサーはそれぞれ染色体・遺伝子の分離、DNAの塩基配列決定に有効に使用された。
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[Publications] Takasawa,S.;Yamamoto,H.;Terazono,K.;Okamoto,H.: Diabetes. 35. 1178-1180 (1986)
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[Publications] Yamamoto,H.;Nata,K.;Okamoto,H.: J.Biol.Chem.261. 6156-6159 (1986)
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[Publications] Yanaihara,C.;Hashimoto,Y;Takeda,Y.;Kato,I.;Track,N.S.;Nokihara,K.;Manaka,H.;Iwanaga,T.;Fujitaa,T.;Okamoto,H.;Yanaihara,N.: Peptide. 7. 83-88 (1986)
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[Publications] Yamagami,T.;Ohsawa,K.;Nishizawa,M.;Inoue,C.;Gotoh,E.;Yanaihara,N.;Yamamoto,H.;Okamoto,H.: Ann.N.Y.Acad.Sci.(1987)
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[Publications] Inoue,C.;Shiga,K.;Takasawa,S.;Kitagawa,M.;Yamamoto,H.;Okamoto,H.: Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1987)
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[Publications] Noguchi,M.;Takahashi,K.;Okamoto,H.: J.Biol.Chem.(1987)
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[Publications] Okamoto,H.;Yamamoto,H.;Yamagami,T.;Takasawa,S.: "Diabetes 1985" Elsevier Science Publishers B.V., 524 (1986)
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[Publications] 山本博,高澤伸,井上千代子,志賀清人,寺薗公雄,北川元生,山上孝司,岡本宏: "遺伝子工学と医学" 東京化学同人, 250 (1987)
