低比重リポ蛋白(LDL)レセプターの構造変異とコレステロール代謝異常

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 62480134
• Research Institution: Medical College of Oita
• Principal Investigator: 桑野 信彦 大分医科大学, 医学部, 教授 (80037431)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 島田 達生 大分医科大学, 医学部, 助教授 (80080555) ; 小野 真弓 大分医科大学, 医学部, 助手 (80128347)
• Keywords: 低比重リポ蛋白(LDL) / LDLレセプター / LDLレセプター構造変異 / コレステロール代謝異常 / 糖鎖構造異変 / マクロファージ / 泡沫化細胞

Research Abstract

1.低比重リポ蛋白(LDL)に対するレセプターの構造機能は、コレステロール代謝と密接に関連している。従ってLDLレセプターの変異はコレステロール代謝異常を示す。我々は試験管内で単離したチャイニーズハムスターCHO細胞由来のモネンシン耐性株Mon^r-31とチャイニーズハムスターV79細胞由来のコンパクチン耐性株MF-2はLDL存在下に高いコレステロール合成を示す。そのLDLレセプターの性質を調べた。その結果、
(1)変異株のLDLレセプターの成熟型は、分子量で約5,000正常な親細胞に較べて小さくなっていることを見出した。この分子量の差はO-糖鎖を切断するO-グリカナーゼ処理によって消失することから、レセプターに存在するO-糖鎖構造が変化していることを示した。
(2)我々の2つの変異株Mon^r-31とMF-2とを細胞融合させて調べると、成熟レセプターの分子量は小さいままであった。このことは、同じ相補性グループに2つの変異が属していることを見出した。また米国MITのKrieger博士らによって単離されたその他のレセプター変異株とは全く異なる新しいタイプの変異であることを明らかにした。
2.マウスマクロファージ細胞J774を用いてLDLを添加すると、エステル型コレステロールの沈着がおこる。このマクロファージに、正常LDLのレセプターが存在することならびにそのレセプターが極めて早い崩壊を示すことを観察した。今後、そのレセプターの崩壊をおこす細胞内分画と分解酵素の性質について明らかにしていく。

Research Products

• [Publications] Kichinobu Tomita: Journal of Biological Chemistry. 262. 1398-1404 (1987)
• [Publications] Takashi yoshida: Biochimica et Biophysica Acta. 921. 575-586 (1987)
• [Publications] Akihiko Yoshimura: Journal of Biological Chemistry. 262. 13299-13301 (1987)
• [Publications] Akihiko Yoshimura: Journal of Biological Chemistry. 263. 11935-11942 (1988)
• [Publications] Satoshi Shite: Journal of Biological Chemistry. 263. (1988)
• [Publications] Tadashi Seguchi: Journal of Biological Chemistry. in press. (1989)
• [Publications] Michihiko Kuwano: "Resistance to tunicamycin,compactin,amphotericin B and monensi" Drug-Resistance in Mammalian Cell CRC Press, (1988)