1990 Fiscal Year Annual Research Report

多包虫症の診断および治療へのモノクロ-ナル抗体の応用

Research Project

Project/Area Number	63480148
Research Institution	Asahikawa Medical College
Principal Investigator	久津見晴彦旭川医科大学, 医学部, 教授 (90072868)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	稲岡徹旭川医科大学, 医学部, 助手 (00091562) 中尾稔旭川医科大学, 医学部, 助手 (70155670)
Keywords	多包虫症 / モノクロ-ナル抗体 / 診断 / 治療
Research Abstract	本研究の主要な目的のひとつは、多包虫症の血清学的診断のための精製抗原を得ることであった。そのため、アフィニティ-クロマトグラフィ-のリガンとして利用できるモノクロ-ナル抗体の作製を目標とした。いくつかの抗体が作製されが、クロ-ンとして確立したものの多くは、単一の多包虫抗原ポリペプチドと反応せず、反応したとしても患者血清が認識する抗原蛋白と分子量が異なっていた。また、多包虫ヨ-ロッパ株で報告された種特異的なEm2(分子量54kDa)抗原に対する抗体も作製できなかった。この原因を探るため、多包虫北海道株の抗原特性を詳細に調査した。多包虫北海道株の蛋白構成を電気泳動(SDSーPAGE)で調べると、ヨ-ロッパ株のEm2に相当する蛋白は存在せず、多包虫には地域的な種内変異があった。また、北海道株の包虫、原頭節、成虫の抗原組成を患者血清を用いたウエスタンブロット法で検討したところ、65kDaと56kDaの蛋白が検出され、これは虫体の発育期を通じて共通の成分であった。他の寄生虫疾患の血清を用いて交差反応を調べた結果、これらの抗原は種特異性が高かった。実験動物の抗体応答を観察すると、マウスでは系統差で抗体応答が異なることが判明した。また、ヒト血清で認識された65kDaと56kDa抗原はマウス血清でも認識されたが、それらが主要な抗原刺激ではなかった。経時的に抗体応答をラットで調ベた結果、65kDa抗原は感染初期から宿主が応答する抗原で、感染後期に移行するに従い、複雑な抗原刺激を受けることが明かとなった。以上の検討から、北海道株が保有する65、56kDa抗原に特異的な抗体を得るためには、脾細胞の採取時期などについて工夫する必要があると思われた。北海道株の65、56kDa抗原は虫体含有量が少ないため、将来、これらの抗原に対する抗体が作製できた場合は、リコンビナント抗原を作製する際のスクリ-ニング用プロ-ブとして利用するのが賢明だろう。

Research Products
(4 results)

All Other

All Publications (4 results)

[Publications] 久津見晴彦: "多包虫症" 最新医学. 44(4). 889-894 (1989)
[Publications] NAKAO M,NAKAYA K,KUTSUMI H.: "Murine model for hepatic alveolar hydatid disease without biohazard" Jpn.J.Parasitol.39(3). 296-298 (1990)
[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Hokkaido isolate of <Echinococcus>___ー <multilocularis>___ー:sterile hydatids,protoscolices and adults share the common antigen" Manuscript.
[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Production of murine monoclonal antibodies against the Hokkaido isolate of <Echinococcus>___ー <multilocularis>___ー" Manuscript.

1990 Fiscal Year Annual Research Report

多包虫症の診断および治療へのモノクロ-ナル抗体の応用

Principal Investigator

久津見晴彦旭川医科大学, 医学部, 教授 (90072868)

Research Products

[Publications] 久津見晴彦: "多包虫症" 最新医学. 44(4). 889-894 (1989)

[Publications] NAKAO M,NAKAYA K,KUTSUMI H.: "Murine model for hepatic alveolar hydatid disease without biohazard" Jpn.J.Parasitol.39(3). 296-298 (1990)

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Hokkaido isolate of <Echinococcus>_ー <multilocularis>_ー:sterile hydatids,protoscolices and adults share the common antigen" Manuscript.

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Production of murine monoclonal antibodies against the Hokkaido isolate of <Echinococcus>_ー <multilocularis>_ー" Manuscript.

1990 Fiscal Year Annual Research Report

多包虫症の診断および治療へのモノクロ-ナル抗体の応用

Principal Investigator

久津見 晴彦 旭川医科大学, 医学部, 教授 (90072868)

Research Products

[Publications] 久津見 晴彦: "多包虫症" 最新医学. 44(4). 889-894 (1989)

[Publications] NAKAO M,NAKAYA K,KUTSUMI H.: "Murine model for hepatic alveolar hydatid disease without biohazard" Jpn.J.Parasitol.39(3). 296-298 (1990)

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Hokkaido isolate of <Echinococcus>___ー <multilocularis>___ー:sterile hydatids,protoscolices and adults share the common antigen" Manuscript.

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Production of murine monoclonal antibodies against the Hokkaido isolate of <Echinococcus>___ー <multilocularis>___ー" Manuscript.

久津見晴彦旭川医科大学, 医学部, 教授 (90072868)

[Publications] 久津見晴彦: "多包虫症" 最新医学. 44(4). 889-894 (1989)

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Hokkaido isolate of <Echinococcus>_ー <multilocularis>_ー:sterile hydatids,protoscolices and adults share the common antigen" Manuscript.

[Publications] NAKAO M,KUTSUMI H.: "Production of murine monoclonal antibodies against the Hokkaido isolate of <Echinococcus>_ー <multilocularis>_ー" Manuscript.