2015 Fiscal Year Annual Research Report
原核生物で発見された真核生物型ユビキチンシステムの機能解析
Publicly Offered Research
| Project Area | New aspect of the ubiquitin system : its enormous roles in protein regulation |
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| Project/Area Number |
15H01179
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
金井 保 京都大学, 工学(系)研究科(研究院), 講師 (10346083)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ユビキチン / アーキア / 原核生物 / 好熱菌 / 進化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
C. subterraneum由来成分から成るUb化再構成系を用いて調製したUb化複合体の結合様式をLC-MS/MS解析により調べた。その結果、高頻度でUb化シグナルが検出される基質タンパク質上の3個のLys残基を特定した。これらのLys残基をArgに置換した変異体MCMを用いてUb化反応実験を行い、それらの位置が主要なUb化残基であることを示した。これらの結果から、本再構成系においてUbは、基質タンパク質の特定のリジン残基とイソペプチド結合を形成していることが予想された。この結果は、本系と真核生物のUb系との反応類似性を表し、これらのシステムの進化的起源が近いことを強く示唆する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
LC-MS/MS解析により、本系のタンパク質Ub化反応の化学的特徴が明らかとなり、真核生物のシステムとの高い類似性が判明した。
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| Strategy for Future Research Activity |
In vitroでの再構成実験により、C. subterraneum Ubシステムの全容が明らかになりつつあることから、今後はその細胞内での再構成実験に軸足を移す。導入生物としてはC. subterraneumと同じく(超)好熱性アーキアで あるThermococcus kodakarensisを用いる。
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| Remarks |
橘高瑞奈:第16回極限環境生物学会優秀ポスター賞授賞、2015年11月9日
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