鉄硫黄クラスター形成を担うSufタンパク質群の立体構造・形成機構の解析
Project/Area Number |
05J01432
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Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 国内 |
Research Field |
Applied microbiology
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
近江 理恵 京都大学, 化学研究所, 特別研究員(PD)
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Project Period (FY) |
2005 – 2007
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2006)
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Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
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Keywords | タンパク質 / 鉄硫黄クラスター / 立体構造 |
Research Abstract |
大腸菌において鉄硫黄クラスターの形成に関与するタンパク質は、複数のタンパク質からなるマシーナリー(Isc, Suf, Nif)を形成している。Sufタンパク質群は、SufA, SufB, SufC, SufD, SufS, SufEで構成されており、細菌から高等真核生物まで幅広く保存されている。Sufタンパク質群のうち、SufS, SufEは鉄硫黄クラスター形成の硫黄供給系として重要な役割を担っており、SufBは複合体として鉄硫黄クラスターの形成に関与することが示唆されている。本研究は、これらのタンパク質および、複合体の結晶構造解析・タンパク質間相雨後作用解析を行うことにより、原子レベルでの鉄硫黄クラスター形成機構を明らかにすることを目的としている。 本年度はSufBCDの調整および結晶化を行った。SufBCD複合体の調整は、SufBCDの遺伝子を共発現することによって複合体としての生産・単離に成功した。また、複合体結晶化条件の検索を、スクリーニングキット等を用いて行った。X線回析に適した結晶が得られなかったため、より安定な複合体を形成する条件を、動的光散乱装置を使って検索し、塩強度、添加剤による複合体安定かへの効果を検討した。その結果、SufBCD複合体のピークの形状はmonomodalで、平均分子量は約160kDaを示した。次に、鉄添加によるSufBCD結晶化への影響を調べるために、鉄結合SufBCDを調整し、現在結晶化を行っている。
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Report
(2 results)
Research Products
(2 results)