Project/Area Number |
09J04253
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Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 国内 |
Research Field |
General medical chemistry
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
北 加奈子 大阪大学, 生命機能研究科, 特別研究員(DC1)
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Project Period (FY) |
2009 – 2011
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2011)
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Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2011: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2010: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2009: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
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Keywords | PIWIファミリータンパク質 / MILIタンパク質 / MIWI2タンパク質 / トランスジェニックマウス / レトロトランスポゾン / 精子形成 / DNAのメチル化 / piRNA / MIWIタンパク質 / TDRD1タンパク質 / 質量分析 |
Research Abstract |
我々の研究室では、胎仔期において、MILI及びMIWI2がDNAのメチル化によるレトロトランスポゾンの制御に関与していることを見出したことから、これらのPIWIファミリータンパク質の機能を更に詳細に解析するために以下に記すトランスジェニックマウスを作成した。 胎仔期ではDNAのレトロトランスポゾン遺伝子であるIAPやLine1の制御領域が高度にメチル化されることによってそれらのレトロトランスポゾンの発現が抑制されている。一方、MILI-KO及びMIWI2-KOマウスではDNAのレトロトランスポゾン遺伝子の制御領域のメチル化が低下することによって転写抑制が解除され、レトロトランスポゾンの転写が増加する。また、MILI及びMIWI2はsmall RNAであるpiRNAと結合し、そのpiRNAの中にはレトロトランスポゾンに対する配列も含まれている。しかし、そのpiRNAがMILI-KO及びMIWI2-KOマウスでは消失していることから、MILIまたはMIWI2はpiRNAを介してDNAメチル化によるレトロトランスポゾン制御に関与していると考えられる。また、胎仔期では、MILIは細胞質に局在する一方、MIWI2は核内に存在することから、MIWI2がこのDNAのメチル化機構に直接関与していることが示唆される。 更に我々は、クロマチン免疫沈降法により、胎仔期の精巣においてMIWI2がゲノム、特にIAPやLine1の制御領域に結合していることも明らかにした。 そこで、今回、DNAのトランスポゾン遺伝子の制御領域に結合するように設計したzinc fingerタンパクとMIWI2を融合したタンパク質を発現させるトランスジェニックマウスを作成し、このタンパク質の十分な発現を確認した。
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Report
(3 results)
Research Products
(3 results)
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[Journal Article] MVH in piRNA Processing and Gene Silencing of Retrotransposons2010
Author(s)
Satomi Kuramochi-Miyagawa, Toshiaki Watanabe, Kengo Gotoh, Kana Takamatsu, Shinichiro Chuma, Kanako Kojima-Kita, Yusuke Shiromoto, Noriko Asada, Tohru Kimura, Norio Nakatsuji, Toshiaki Noce, Hiroyuki Sasaki, Toru Nakano
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Journal Title
Genes and development (in press)
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Peer Reviewed
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[Journal Article]2009
Author(s)
宮川(倉持), さとみ・小島, 加奈子
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Journal Title
幹細胞研究の最新の進歩 生殖幹細胞とPIWI(最新医学社)
Pages: 94-103
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